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以 3H-TdR 掺入测定DNA合成实验
用3H -TdR 标记细胞,提取DNA用闪烁仪测定放射活性水平来源:动物细胞培养:基础技术指南第五版
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细胞的 PFA 固定实验
当纯净甲醛在水溶液中溶解时,会自动聚合成长链的多聚甲醛。其长度不一,在水中同时进行聚合与解聚反应。甲醛易溶于脂类物质,因此能穿过细胞膜进入细胞内。用多聚甲醛固定细胞时,能使细胞内的自由氨基基团发生化学交联。当不同的分子发生交联时,形成一网状结构,把细胞的各个结构成分连接起来。
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T 淋巴细胞转化实验
T 细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母细胞转化。(来源:免疫学实习指导——北京大学医学部基础医学院免疫学系)
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NK 细胞活性测定:LDH 法
本实验主要用于测定NK细胞活性。
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DAPI 染色
用DAPI进行细胞染色
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AO 染色法(丫啶橙染色法)检测细胞凋亡
染料同时染色细胞,为鉴别凋亡细胞和坏死细胞提供较好的方法
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超纯水(UPW)的制备和灭菌
本实验来源于:动物细胞培养——基本技术指南(第五版)
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125I-UdR 释放试验测定 NK 细胞活性
自然杀伤(NK)细胞参与了机体免疫防御的第一道防线,主要用于(1)免疫监视系统中抗肿瘤抗病毒(2)免疫调控。
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PI3K/Akt/mTOR 信号通路
PI3K/Akt/mTOR信号通路可以:(1)诱导缺氧诱导因子1的表达和活性;(2)作为细胞内非常重要的信号转导途径;(3)在细胞的生长、存活、增殖、凋亡、血管生成、自吞噬等过程中发挥着极其重要的生物学功能。
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Wnt/β-catenin 信号通路
Wnt信号通路是一种蛋白质网络,他们在胚胎发育和癌症中发挥了重要的作用,同时也参与了成年动物的正常生理过程 (1)调节了转录辅助因子β-catenin稳定性和依赖β-catenin基因的表达。(2)有助于理解人类疾病的发生机制,为疾病的治疗提供一个新的靶点。
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TGF-f3/Smad 信号通路相关蛋白表达
转化生长因子(TGF)-13/Smads信号传导通路相关蛋白表达主要用于:(1)研究肿瘤组织TGF-13/Smad信号传导通路中相关蛋白的表达;(2)联系临床病理资料作相关分析,阐明癌症发病机制。
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小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养实验
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养可应用于:(1)细胞保种;(2)分子生物学研究;(3)基因治疗相关研究。
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细胞凋亡中 Caspase-3 活性的检测
细胞凋亡中Caspase-3活性的检测主要应用于(1)酶的活力测定(2)细胞凋亡指标检测。
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staurosporine 诱导的细胞凋亡
Staurosporine是蛋白激酶C和其他大部分激酶(包括酪氨酸蛋白激酶)强有力的抑制剂。通过阻断磷酸二酯键从DNA转移到活化的酪氨酸位点而直接抑制拓普异构酶II的活性。可用于诱导CHO细胞凋亡。
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DNA 降解断裂法检测肿瘤细胞凋亡
DNA降解断裂法检测肿瘤细胞凋亡可以用于:(1)检测肿瘤细胞的凋亡;(2)检测药物治疗肿瘤的效果。
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Tec 真核表达载体构建及其对细胞信号的影响实验
Tec(Tyrosinekinaseexpressedinhepatocelluar carcinoma)是一种重要的非受体型酪氨酸激酶,最早由Mano等,从肝癌组织中克隆。人Tec编码框是由1893个碱基组成的开放读码框,编码630个氨基酸组成的分子量为73 ku 的蛋白质,由PHdo main、THdomain、SH3domain、SH2domain和Kinase domain四部分组成。
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含有目的基因真核表达 pEGFP-C1 载体的构建实验
本实验是以DNA为模板,在4种核苷酸存在的条件下,借助DNA聚合酶作用出现的酶促合成,依赖于在加热条件下,双链DNA解离成单链(变性),降温(复性),使引物与单链特异性结合,同时使4种核苷酸在DNA聚合酶的作用下,发生以引物为起点进行聚合的现象,使DNA链不断延伸,PCR反应进行。内容来源:中国医科大学实验指导手册。
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乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞活性实验
本实验来源第四军医大学官方网站
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Calcein 释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验
本实验来源第四军医大学官方网站
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DNA 荧光染色的样品制备实验
本实验方法来源于第四军医大官方网站
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