PI3K/Akt/mTOR 信号通路

实验分类：

细胞实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

PI3K/Akt/mTOR信号通路可以：（1）诱导缺氧诱导因子1的表达和活性；（2）作为细胞内非常重要的信号转导途径；（3）在细胞的生长、存活、增殖、凋亡、血管生成、自吞噬等过程中发挥着极其重要的生物学功能。

来源：丁香实验

操作方法

特异性阻断法

一、细胞株表达情况监测 1. 在培养的HepG2、Hep3B人肝癌细胞株和人正常肝细胞株QSG-7701上，以免疫印迹方法（Western blot）检测各细胞株中PI3K（p110α亚单位）、PTEN、pAkt（S473，T308）和p-mTOR（S2448）的表达情况。 2. 分别用 PI3K抑制剂LY294002（50 umol/ml）和mTOR抑制剂Rapamycin（RAPA，50

mTOR抑制剂作用法

一、细胞表达检测 1. 分别取对数生长期的HepG2和Hep3B细胞，以不同浓度的DOX单用或与RAPA（20 nmol/ml）联合应用培养48 h或24h。 2. 以MTT法测定药物对HepG2和Hep3B细胞的增殖抑制作用，以流式细胞技术检测二者的凋亡情况，以 Western blot法检测者P-p70S6K（T389）、P-4E-BP1（S65）和pS6（S235/236）的

样本比较法

一、细胞表达检测 1. 76例HCC组织样本经临床病理分期分级。 2. 免疫组织化学方法检测HCC组织和癌旁组织中p53、pAkt、PTEN、p-mTOR和pS6的表达情况。 3. 分析上述指标在不同HCC病理特征条件下的阳性表达率，并与正常肝组织比较。二、细胞表达结果 1. p53、pAkt、PTEN、p-mTOR和pS6在人HCC组织有不同程度的表达，H