原理
分析人HCC组织中PI3K/Akt/mTOR信号通路的活化水平与p53的表达及HCC临床病理参数之间的关系,评估PI3K/Akt/mTOR信号通路在HCC诊断和预后评价中的作用。
材料与仪器
HCC组织样本
蒸馏水
荧光倒置相差显微镜 二氧化碳培养箱 流式细胞仪 培养板
蒸馏水
荧光倒置相差显微镜 二氧化碳培养箱 流式细胞仪 培养板
步骤
一、细胞表达检测
1. 76例HCC组织样本经临床病理分期分级。
2. 免疫组织化学方法检测HCC组织和癌旁组织中p53、pAkt、PTEN、p-mTOR和pS6的表达情况。
3. 分析上述指标在不同HCC病理特征条件下的阳性表达率,并与正常肝组织比较。
1. 76例HCC组织样本经临床病理分期分级。
2. 免疫组织化学方法检测HCC组织和癌旁组织中p53、pAkt、PTEN、p-mTOR和pS6的表达情况。
3. 分析上述指标在不同HCC病理特征条件下的阳性表达率,并与正常肝组织比较。
二、细胞表达结果
1. p53、pAkt、PTEN、p-mTOR和pS6在人HCC组织有不同程度的表达,HCC组织p53(60.5%,46/76)、 pAkt(92.1%,70/76)、p-mTOR(84.2%,64/76)和pS6(88.2%,67/76)的阳性表达比例较癌旁肝组织(分别为 10.5%,8/76、63.2%,48/76、46.1%,35/76、52.6%,40/76)和正常肝组织(分别为0%、55.0%,11/20、 50.0%,10/20、45.0%,9/20)显著升高(P<0.01),而PTEN(65.8%,50/76)的阳性表达比例较癌旁肝组织 (89.5%,68/76)和正常肝组织(85.0%,17/20)显著减少(P<0.05)。
2. p53阳性表达HCC组织pAkt、p-mTOR和 pS6的阳性表达率较p53阴性表达组织显著升高(P<0.01),而PTEN的阳性表达率较p53阴性表达组织显著降低(P<0.01)。
3. 低分化、存在血管侵袭、TNM分期高的HCC组织p53、pAkt、p-mTOR和pS6的阳性表达率较相对应的分化较好、无血管侵袭、TNM分期低的HCC 组织显著升高(分别P<0.01或P<0.05);而PTEN的阳性表达率显著降低(分别P<0.01或P<0.05)。
1. p53、pAkt、PTEN、p-mTOR和pS6在人HCC组织有不同程度的表达,HCC组织p53(60.5%,46/76)、 pAkt(92.1%,70/76)、p-mTOR(84.2%,64/76)和pS6(88.2%,67/76)的阳性表达比例较癌旁肝组织(分别为 10.5%,8/76、63.2%,48/76、46.1%,35/76、52.6%,40/76)和正常肝组织(分别为0%、55.0%,11/20、 50.0%,10/20、45.0%,9/20)显著升高(P<0.01),而PTEN(65.8%,50/76)的阳性表达比例较癌旁肝组织 (89.5%,68/76)和正常肝组织(85.0%,17/20)显著减少(P<0.05)。
2. p53阳性表达HCC组织pAkt、p-mTOR和 pS6的阳性表达率较p53阴性表达组织显著升高(P<0.01),而PTEN的阳性表达率较p53阴性表达组织显著降低(P<0.01)。
3. 低分化、存在血管侵袭、TNM分期高的HCC组织p53、pAkt、p-mTOR和pS6的阳性表达率较相对应的分化较好、无血管侵袭、TNM分期低的HCC 组织显著升高(分别P<0.01或P<0.05);而PTEN的阳性表达率显著降低(分别P<0.01或P<0.05)。
三、细胞表达结果分析
1. 人HCC组织存在PI3K/Akt/mTOR信号通路的激活。
2. 人HCC组织PI3K/Akt/mTOR信号通路的活化程度与p53的表达可能有相关性。
3. 人HCC组织PI3K/Akt/mTOR信号通路的活化程度与HCC的临床病理特征有关,活化程度越高的HCC其分化程度越低、血管侵袭多发、TNM分期高。
1. 人HCC组织存在PI3K/Akt/mTOR信号通路的激活。
2. 人HCC组织PI3K/Akt/mTOR信号通路的活化程度与p53的表达可能有相关性。
3. 人HCC组织PI3K/Akt/mTOR信号通路的活化程度与HCC的临床病理特征有关,活化程度越高的HCC其分化程度越低、血管侵袭多发、TNM分期高。
来源:丁香实验