小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）原代培养实验

实验分类：

细胞实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养可应用于：（1）细胞保种；（2）分子生物学研究；（3）基因治疗相关研究。

来源：丁香实验

操作方法

胰酶消化法1

一、实验材料准备 1. 动物孕期14至16天的孕鼠(小鼠)。 2. 试剂无Ca2+和Mg2+的PBS(D-PBS)、0.05%胰酶、0.53 mmol/L EDTA溶液、MEF生长培养基(高糖DMEM加10%FBS)。 3. 器械眼科直剪3把、眼科直镊3把、眼科弯镊2把、玻璃平皿3套、200目尼龙滤网、50 ml和15 ml离心管和手术刀片。以

胰酶消化法2

一、取得小鼠胚胎 1. 性成熟母小鼠与种公鼠按1公（♂）:2母（♀）比例合笼。 2. 每天早上观察母小鼠阴道口。有乳白色或蛋黄色冻胶状物(阴道栓)即确定为怀孕。见栓当天上午定为怀孕的0.5d。 3. 取怀孕12.5～14.5 d母鼠，断颈处死，无菌条件下暴露子宫。 4. 用镊子提起近子宫颈端，分离子宫系膜，剪断子宫角。 5. 取出整个子宫，置于有PBS的平皿内。用PBS洗涤三次，弃除表