细胞凋亡中 Caspase-3 活性的检测

1、收集细胞；2、PBS洗涤；3、抽提细胞裂解液；4、蛋白定量；5、SDS-PAGE电泳，硝酸纤维素膜或PVDF膜转移，5%脱脂奶粉封闭，室温1.5——2h或4°C过夜；6、Caspase-3多抗或单抗室温反应1——2h或4℃过夜，TBS-T（含0.05% Tween 20的TBS）洗3次，5——10min/次；7、HRP-标记的羊抗鼠IgG或AP标记的羊抗鼠IgG室温反应1——2h→ TBS-T