细胞的 PFA 固定实验

细胞实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

当纯净甲醛在水溶液中溶解时，会自动聚合成长链的多聚甲醛。其长度不一，在水中同时进行聚合与解聚反应。甲醛易溶于脂类物质，因此能穿过细胞膜进入细胞内。用多聚甲醛固定细胞时，能使细胞内的自由氨基基团发生化学交联。当不同的分子发生交联时，形成一网状结构，把细胞的各个结构成分连接起来。

来源：丁香实验

操作方法

悬浮法

1. 吸取浓度为2×107细胞/ml 的细胞悬液10 μl，滴于多聚L-赖氨酸包被的载玻片上。置于加湿盒中，使细胞静置30 min。 2. 将玻片放入玻片架，浸于盛有4%PFA固定液的染色用玻璃盘中，室温固定 20 min。 3. 将玻片架移至另一盛有3×PBS的盘中，放置2 min（此步终止PFA固定作用）。 4. 将玻片架移至一新的含1×PBS的盘中，放置2 min