材料与仪器
细胞悬液
PFA PBS
载玻片 加湿盒 玻璃染色盘
PFA PBS
载玻片 加湿盒 玻璃染色盘
步骤
1. 吸取浓度为2×107细胞/ml 的细胞悬液10 μl，滴于多聚L-赖氨酸包被的载玻片上。置于加湿盒中，使细胞静置30 min。
2. 将玻片放入玻片架，浸于盛有4%PFA固定液的染色用玻璃盘中，室温固定 20 min。
3. 将玻片架移至另一盛有3×PBS的盘中，放置2 min（此步终止PFA固定作用）。
4. 将玻片架移至一新的含1×PBS的盘中，放置2 min。换1×PBS后，再放置2 min。
4. 将玻片架移至一新的含1×PBS的盘中，放置2 min。换1×PBS后，再放置2 min。
5. 在盘中相继加换50%、70%、95%、100%乙醇，在毎种溶液中放置5 min 以进行脱水。
6. 在空气中使玻片完全干燥，放于有干燥剂的玻片盒中，-70℃存放（可存数周）。
来源：丁香实验
