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简介
用DAPI进行细胞染色
原理
DAPI为4’,6二脒基-2-苯吲哚(4’,6―diamidino-2―phenylindole)能与双链DNA小槽,特别是AT碱基结合,也可插入少于3个连续AT碱基对的DNA序列中。当它与双链DNA结合时,荧光强度增强20倍,而与单链DNA结合则无荧光增强现象。
应用
细胞染色
来源:丁香实验
操作方法
DAPI的配制及贮存固体粉末 :避光,2-8 ℃保存,3年没有问题。贮存液 :用无菌水配制成浓度1 mg/ml 的贮存液,配好后用锡纸包起来,避光,可在-20 ℃下长期保存。(DAPI易溶于水,在PBS中溶解度不高)使用浓度 :贮存液用1xPBS稀释到终浓度100 ng/ml。荧光封片液 :0.5 mol/L碳酸盐缓冲液与甘油等体积混合,pH9.5染色与观察 :制好的玻片上滴加几滴DAPI染液,染