在辛辛苦苦进行了表达和纯化目的蛋白后,我们不免会面临另一个问题:如何储存纯化后的蛋白呢?如果不加注意,就会有前功尽弃的可能。 首先,储存方法的选择取决于蛋白质的稳定性,以及后续实验使用蛋白质的时间和用途。储存时需要避免接近蛋白质稳定极限的储存条件(例如极端 pH 或者接近蛋白质等电点的 pH)。 其次,避免添加会干扰后续实验的成分。 保存方法 1. 短期保存(24 小时内) 大多数的蛋白质可以保存在 4°C。 2. 在 4°C 超过 24 小时 需要考虑对蛋白样品灭菌过滤(使用
蛋白质翻译后修饰 (Protein translational modifications,PTMs) 通过功能基团或蛋白质的共价添加、调节亚基的蛋白水解切割或整个蛋白质的降解来增加蛋白质组的功能多样性。这些修饰包括磷酸化、糖基化、泛素化、亚硝基化、甲基化、乙酰化、脂质化和蛋白水解,几乎影响正常细胞生物学和发病机制的所有方面。因此,识别和理解 PTM 在细胞生物学和疾病治疗和预防的研究中至关重要。 看到一篇 Thermo Fisher的文章,关于翻译后修饰Post
蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)对解析生命活动过程与疾病发生发展过程至关重要。随着时代发展,虽然大规模、高通量的生物学研究手段大大促进了蛋白质相互作用的预测,但这种预测还需要进一步利用体外和体内系统进行验证。分析蛋白质互作的方法多种多样,本篇文章为大家介绍以下几种互作分析技术: 免疫共沉淀 Co-IP 免疫沉淀 (IP)、免疫共沉淀 (Co-IP)和 pull-down 都是常用的从复杂的混合样品中获取目标分子,以进行下一步分析的方法,如检测蛋白质能否相互作用。在此类实验中,被研究的蛋白质称为