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专题封面
蛋白质修饰
专题51 内容  172 订阅
蛋白质测序
蛋白质测序可用于: (1)鉴定蛋白质; (2)表征蛋白质翻译后修饰。 (3)分析蛋白质一级结构与功能的关系。
实验概况收录 1 操作方法 · 2 相关问答 · 3 相关文章
蛋白质沉淀技术
在过去的 100 年里,虽然人们已经使用过多种不同的沉淀方法,但是 AS 沉淀一直都得到了最广泛的应用,尤其对于酸性蛋白质。此外,PEI 沉淀的应用也正日益普及。接下来,将会对这两种方法进行详细的讨论, 随后对其他几种沉淀方法做简单概述,并针对沉淀过程中沉淀的处理和纯化效率的最大化提出一般性建议。
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关问答 · 3 相关文章
蛋白质激酶C
1. 在冰浴的离心管内配制如下 20 μl 反应混合物:5X PKC 分析缓冲液                                        4 μl10 mg/ml 组蛋白 HI 储存液                             1 μl    [γ-32P] ATP(终浓度 5 μCi/5 μmol/L ATP)      1 μl水(取决于下一步所加的激酶样品的量)          0~14 μl 5X PKC 分析缓冲液:100 mmol/L Tris
操作方法所属实验:用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验
蛋白质盐析
1.  卵清蛋白的分离 (1)取卵清约2 ml 于试管中, 加等体积的饱和硫酸铵溶液,搅拌均匀, 蛋白质析出, 静置, 用滤纸过滤致滤液澄清, 沉淀即为卵球蛋白, 将此沉淀用2 ml 半饱和硫酸铵洗涤一次。(2)将析出卵清球蛋白后的滤液放入试管中, 再加入固体硫酸铵使之达饱和, 观察有无沉淀产生, 若有沉淀, 则过滤之。滤出的沉淀即为卵清白蛋白。2.  脱盐(1)凝胶柱的准备: 称取葡聚糖凝胶sephadexG-25 5 g , 加入80 ml 洗脱液(蒸馏水) , 在沸水浴中溶涨30 min
操作方法所属实验:蛋白质的盐析分级分离及凝胶层析脱盐实验
实验问答1917 围观
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纯化后的蛋白质怎样保存?

在辛辛苦苦进行了表达和纯化目的蛋白后,我们不免会面临另一个问题:如何储存纯化后的蛋白呢?如果不加注意,就会有前功尽弃的可能。 首先,储存方法的选择取决于蛋白质的稳定性,以及后续实验使用蛋白质的时间和用途。储存时需要避免接近蛋白质稳定极限的储存条件(例如极端 pH 或者接近蛋白质等电点的 pH)。 其次,避免添加会干扰后续实验的成分。 保存方法 1. 短期保存(24 小时内) 大多数的蛋白质可以保存在 4°C。 2. 在 4°C 超过 24 小时 需要考虑对蛋白样品灭菌过滤(使用

文章资讯16730 阅读
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蛋白质翻译后修饰(PTMs)概述

蛋白质翻译后修饰 (Protein translational modifications,PTMs) 通过功能基团或蛋白质的共价添加、调节亚基的蛋白水解切割或整个蛋白质的降解来增加蛋白质组的功能多样性。这些修饰包括磷酸化、糖基化、泛素化、亚硝基化、甲基化、乙酰化、脂质化和蛋白水解,几乎影响正常细胞生物学和发病机制的所有方面。因此,识别和理解 PTM 在细胞生物学和疾病治疗和预防的研究中至关重要。 看到一篇 Thermo Fisher的文章,关于翻译后修饰Post

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蛋白质实验锦囊
专题20 内容  160 订阅
蛋白质定量实验
蛋白质定量实验主要用于测定蛋白质含量。
实验概况收录 3 操作方法 · 1 相关问答 · 3 相关文章
蛋白质分离和分析
详细阐述利用亲和层析分离蛋白质的过程,进行蛋白质分析时,需将此规模缩小至微量离心管中进行免疫沉淀过程,对于单一的蛋白质或由相同亚基组成的蛋白质,经单向凝胶电泳后检测到单一的 蛋 白 质 条 带对荧光染色法进行了阐述,它主要用于磷蛋白和糖蛋白的检测。为了确定蛋白质是否是特异性抗原,可采用相对应的抗体进行免疫印迹分析作者:J.E.科利根等,译者:曹雪涛等,本实验来自「精编免疫学实验指南」
实验概况收录 4 操作方法 · 3 相关问答 · 3 相关文章
蛋白质转染法
1. 每个周期的成纤维细胞(最初细胞密度为5×104个细胞/孔,第一次治疗是在夜间进行的用重组重新编程蛋白质(即 Oct4-11R, Sox2-11R, Klf4-(11R,和c-Myc-11R),在8mg/ml的补充或补充mESC生长培养基中供给 1mm丙戊酸(VPA)的蛋白质,和 可以显著提高编程效率的HDAC抑制剂。另一培养基没有VPA和抑制剂,两个培养基在下一个循环前培养36h。2. 在完成四个重复的蛋白转导后,撞击蛋白质后处理过的细胞转移到辐照的mef饲料细胞并简单保存在mESC生长
操作方法所属实验:蛋白质转染诱导 ips 细胞
🔥 心脏组织蛋白提取
蛋白质是生命体中最重要的基本组成部分之一,它们在细胞的结构和功能中起着至关重要的作用。因此,研究蛋白质的结构和功能对于理解生命体的基本机制和开发新药物具有重要意义。蛋白质提取是研究蛋白质的关键步骤之一。
操作方法所属实验:🔥 组织蛋白质的提取
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蛋白质修饰和蛋白质表达的关联分析

本节课包含了泛素化与蛋白质表达之间的关联分析、基于蛋白和修饰组学的癌症分子分型分析等知识点。

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这些蛋白质互作实验方法,你都了解吗?

蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)对解析生命活动过程与疾病发生发展过程至关重要。随着时代发展,虽然大规模、高通量的生物学研究手段大大促进了蛋白质相互作用的预测,但这种预测还需要进一步利用体外和体内系统进行验证。分析蛋白质互作的方法多种多样,本篇文章为大家介绍以下几种互作分析技术: 免疫共沉淀 Co-IP 免疫沉淀 (IP)、免疫共沉淀 (Co-IP)和 pull-down 都是常用的从复杂的混合样品中获取目标分子,以进行下一步分析的方法,如检测蛋白质能否相互作用。在此类实验中,被研究的蛋白质称为

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蛋白质纯化
专题71 内容  510 订阅
蛋白质合成实验
比色法可测定在任何一个时间点上的总蛋白量。在一定时期内连续观察可以用来测 定净蛋白质的累积或丟失(也就是合成的蛋白质—降解的蛋白质)。此时蛋白质合成 可以用放射标的氨基酸与细胞孵育来进行液闪测定,诸如 3H -亮氨酸或 35S-甲硫氨酸,所测定的是掺入到 106 个细胞或是某一段时间内每克蛋白质中的放射活性。来源:动物细胞培养:基础技术指南第五版
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