蛋白质激酶C

PKC 分析缓冲液 组蛋白 HI 储存液 磷脂酰丝氨酸 甘油二油酸脂

1. 在冰浴的离心管内配制如下 20 μl 反应混合物：

5X PKC 分析缓冲液                                        4 μl

10 mg/ml 组蛋白 HI 储存液                             1 μl    

[γ-³²P] ATP（终浓度 5 μCi/5 μmol/L ATP）      1 μl

水（取决于下一步所加的激酶样品的量）          0~14 μl 

5X PKC 分析缓冲液：

100 mmol/L Tris-HCl，30℃ 时（pH 7.5)

25 mmol/L MgCl₂

1 mmol/L CaCl₂

100 μg/ml 磷脂酰丝氨酸（PS）

10 μg/ml 甘油二油酸脂（Sigma）

2. 往预热的反应混合物中加入 1~14 μl 激酶样品，开始反应。

3. 于 30℃ 反应一定时间。

4. 分析反应产物。