材料与仪器
ATP储存液
步骤
一、Mg-ATP 储存液的配制
ATP 买来时通常是钠盐。大多数激酶需要 ATP 镁盐作为高效底物。有时可以用锰代替镁。
1. 20 mmol/L MgCl2 或 MgSO4
2. 20 mmol/L Na2-ATP
以 1:1 的比例混合这两种溶液，测 pH 值。慢慢将 pH 值调至 pH 7.4。如果出现沉淀，应继续搅拌，并要保持 pH 值在 pH 7.4。这就配成了 10 mmol/L 的 Mg-ATP 储存液。将溶液分成小份保存于 -20℃，可以放一年以上。
二、[γ-32P] ATP 使用液的配制
[γ-32P] ATP 供应商有 Amersham Int、NEN 和 ICN；通常可以买到不同比活性的 [γ-32P] ATP。适宜使用的比活性是 3000 Ci/mmol，通常刚买来时的浓度是 10 mCi/ml。Amersham’s Rerfivue [γ-32P] ATP 溶液用起来很方便，因为它可以保存于 4℃ 而不是 -20℃。
ATP 买来时通常是钠盐。大多数激酶需要 ATP 镁盐作为高效底物。有时可以用锰代替镁。
1. 20 mmol/L MgCl2 或 MgSO4
2. 20 mmol/L Na2-ATP
以 1:1 的比例混合这两种溶液，测 pH 值。慢慢将 pH 值调至 pH 7.4。如果出现沉淀，应继续搅拌，并要保持 pH 值在 pH 7.4。这就配成了 10 mmol/L 的 Mg-ATP 储存液。将溶液分成小份保存于 -20℃，可以放一年以上。
二、[γ-32P] ATP 使用液的配制
[γ-32P] ATP 供应商有 Amersham Int、NEN 和 ICN；通常可以买到不同比活性的 [γ-32P] ATP。适宜使用的比活性是 3000 Ci/mmol，通常刚买来时的浓度是 10 mCi/ml。Amersham’s Rerfivue [γ-32P] ATP 溶液用起来很方便，因为它可以保存于 4℃ 而不是 -20℃。
来源：丁香实验
