常用储存液的配制
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溶液
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配制方法
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注释
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PBS
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将8.0g NaCl、0 2gKCl、1.44g Na2 HPO4 、0.24g KH2 PO4 ,溶于800ml蒸馏水中,将pH调整至7.4,补充蒸馏水至1L,分装,高压灭菌,室温保存
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可配成10x储存液
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TBS
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将8.0g NaCl、0.2g KCl、3gTris,溶解于800ml蒸馏水中,用1mol/LHCl将pH调整至8.0,补充蒸馏水至1L,分装,高压灭菌,室温保存
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10% NaN3
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将10g NaN3 溶解于100ml蒸馏水中,室温保存
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活体实验或在辣根过氧化物酶反应中不可使用NaN3
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3% BSA/PBS
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100ml PBS中加入3g BSA(组分V)使溶解,再加入0.2ml10% NaN3
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1mol/L Tris
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将121gTris 溶解于800ml蒸馏水中,用浓HCl调整至所需pH,补充蒸馏水至1L,分装,高压灭菌,室温保存
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500mmol/L EDTA
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将186g EDTA.Na2.2H2 0溶解于400ml蒸馏水中,用NaOH将pH调整至8.0,补充蒸馏水至500ml,分装,高压灭菌,室温保存
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100%(W/V)三氯醋酸(TCA)
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将227ml蒸馏水加到含500g TCA的瓶中
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1.5mol/L Tris(pH8.8)
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将181.5gTris 溶解于800ml蒸馏水中,用浓HCl调整至pH至8.8,补充蒸馏水至1L,分装,高压灭菌,室温保存
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1mol/L Tris(pH6.8)
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将12.1gTris 溶解于80ml蒸馏水中,用浓HCl调整至pH至6.8,补充蒸馏水至100ml,分装,高压灭菌,室温保存
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10% SDS
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将10g SDS溶解于100ml蒸馏水中,室温保存
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10%过硫酸铵(APS)
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将0.5g SDS溶解于5ml蒸馏水中,4℃保存
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每周配制新鲜溶液
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4%多聚甲醛
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在磁力搅拌下,将4g多聚甲醛(EM级)溶于100ml PBS,加入数滴NaOH,在通风柜中于60℃加热(打开瓶盖)使其溶解,冷却至室温,调整pH为7.4
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使用前新鲜配制
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NP-40裂解液
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配制1L需30ml 5mol/L NaCl、100ml 10%NP-40、50ml 1mol/LTris(pH8.0)802ml蒸馏水,混匀,4℃保存
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甘油抗褪色封裱剂
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在100ml甘油中加入5gn-没食子酸丙酯、0.25g DBACO、2.5g对苯二胺,使溶解,加入数粒NaOH使pH值偏碱性。充分搅拌(>1d),小量分装,包于锡纸中,-20℃保存
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