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FITC会结合到细胞膜上吗?
毛利小五郎的徒弟
FITC不会结合到细胞膜FITC在细胞上没有结合位点,需要借助于抗体结合。
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问
想比较两种营养干预对小鼠肠粘膜Muc2表达的影响,用切片好呢?还是用提mRNA?
毛利小五郎的徒弟
还是用mrna比较好,结果准确可信
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问
做空肠的免疫荧光,测杯状细胞和潘氏细胞数量,可以在同一切片上同时染吗?
Eason老歌迷
可以的,是可以在同一切片上同时染色的。
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问
纯化抗体时,磁珠总是拉不下来蛋白,怎么办
Eason老歌迷
可能是你的洗脱调节太温和。提高洗脱液咪唑浓度至500mM,还不能洗脱时,可以尝试降低洗脱液pH至4.0,但低pH会也导致金属离子脱落;也可能是 蛋白吸附在磁珠上无法洗脱。对于非特异性疏水吸附的蛋白,可以增加NaCl浓度至1M,或添加0.1%~2%的Triton X-100。对于聚集沉淀在磁珠上的,可以在洗脱缓冲液中加入6M盐酸胍进行变性洗脱。
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问
流式分析调整染色补偿需要注意什么?
小小小小小芳
需要注意的是:单色阳性样本需要有足够的阳性细胞使用和样本相同的颜色,确保强度不低于样本如果用微珠代替细胞,要注意某些细胞的染色可能强于微珠上机后,先调整电压,使目标阳性峰在自己的通道上高于其他的通道记录数据,就算补偿
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问
非标签抗体常用的纯化组合方式有哪些?对缓冲液的依赖性大吗?
Eason老歌迷
有很多。比如说 盐析法(饱和硫酸铵沉淀法),正辛酸-饱和硫酸铵沉淀法,Protein A 和 protein G 纯化法, 免疫亲和纯化法等。
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问
影像图像重采样
Eason老歌迷
需要啊,需要使用网格插值对图像重采样
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问
普利莱E1015
Eason老歌迷
用过。我也遇到过这种情况。我建议你可以离心沉淀看看
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问
巨噬细胞同时高表达cd206和cd86是为什么呀?
elabscience
在某些条件下巨噬细胞中会存在部分CD86/CD206双阳性的细胞,但是一般不会两者都达到90%以上的阳性,有可能您所说的阳性是假阳性,出现这种情况需要从以下几个方面去思考:1.抗体荧光选择是否正确;2.是否正确调节了荧光补偿;3.是否有做好封闭;4.是否有做同型对照;5.细胞状态是否良好;6.抗体本身是否达标(特异性,用量,保质期等)
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问
500ml苏木素可以染多少张片子呢?
Eason老歌迷
我们用的,一般500ml可以染差不多1000来张,1500张
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问
mirna qpcr不出来
genecreate
引物是否涉及正确,反转录是否正确?
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问
抗原诱导机体产生的抗体有哪些用途?用抗原诱导机体产生不同用途的抗体时,对相用抗原有什么要求?
huarenqiang5
抗体是一类能与抗原特异性结合的免疫球蛋白,所以作用主要包括以下几方面:1、中和毒素和阻止病原体入侵,抗体在体外可发生各种抗原、抗体结合反应,有利于抗原或抗体检测、功能判断,在体内可中合毒素、阻断病原体入侵、清除病原微生物。2、激活补体产生攻膜复合物,使细胞溶解破坏,抗体与相应抗原结合后,可通过经典途径激活补体系统,产生多种效应功能。3、调理吞噬和抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用,调理作用是指IgG
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问
为获得高质量的抗血清应该怎么做
Dr_劉医生
从血清样本来讲,来源肯定是健康规律生活的人群,其次再离心分选的时候严格无菌操作,
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问
产前诊断中心检验诊断工作状态如何?属于高压高风险么?
drhyg2005
按照标准流程做,压力很小的,比临床轻松多了。
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问
求问类中性粒细胞模型可靠度
毛利小五郎的徒弟
最好还是原代,类中性细胞与原代相比细胞有改变。
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问
用HepG2 2.2.15细胞筛选抗乙肝药物
huarenqiang5
抗 HBV 药物的活性筛选选用 HepG2 2.2.15 细胞及 DHBV 阳性鸭血清感染北京芙蓉鸭两种模型,检测体外药物对病毒抗原表达的抑制作用、药物对鸭血清 DHBV DNA 的抑制作用。 体外抗 HBV 药效检测 材料与方法体外细胞模型: 乙型肝炎病毒(HBV)转染的 HepG2 细胞, 即 HepG2 2.2.15 细胞。MTT法检测样品对细胞的毒
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问
关于免疫检查点的表达的问题
汤姆卜丽波
因为他们三个本身都表达在活化细胞上,他们的表达调控了肿瘤发生发展过程中的免疫反应,他们的表达水平本身就可以作为免疫指标
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问
生物药生物学活性方法开发思路及材料收集?
汤姆卜丽波
如果是收集最新的研究方向和成果的话,可以上pubmed搜索,目前生物学活性方法主要可以用来检测生物大分子之间的结合效力,可用于药物小分子和蛋白质大分子结合检测,可用方法有ITC,SPR等等
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问
流式细胞仪器如何调整补偿,关于这方便有什么参考的文献或者书籍吗?
elabscience
补偿基本方法同下图,更多内容可以直接查看流式细胞术相关书籍。
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问
流式细胞上机时如何调电压
毛利小五郎的徒弟
fortessa仪器上机时,设置电压强度不光是按照细胞的大小还应考虑到细胞的种类,群体以及细胞之间的比例差异。
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