比巴比巴卜
小妹今天做了一个FITC(纯物质)孵育细胞,然后染核,拍共聚焦的实验,发现FITC没有进入细胞但是染上了细胞膜,细胞膜那一圈亮亮的,可是FITC不是不会直接染细胞膜的吗?如果是FITC不进入细胞黏附在细胞膜上,我洗了几遍pbs都洗不掉吗?
毛利小五郎的徒弟
FITC不会结合到细胞膜
FITC在细胞上没有结合位点,需要借助于抗体结合。
比巴比巴卜
那请问有没有可能粘附在细胞膜上呢?就是不是结合
Eason老歌迷
FITC只是一种荧光素,细胞并不能特异性地和该染料结合。FITC一般都是先结合到抗体,或者其他可以和细胞特异性结合的物质上,再用后者来标记细胞的。
比巴比巴卜
那请问有没有可能不是特异性的,而是非特异性的吸附到细胞膜上呢?有看到文献直接将大肠杆菌和FITC孵育,能看到绿色荧光
balalaLy
你的Fitch标记了什么物质?在膜上面说明是标记的物质跟膜上的蛋白或者其他啥的物质结合了。
比巴比巴卜
不是的,什么也没标记,就是纯的FITC,做了一个孵育实验,结果发现黏在了细胞膜上