mirna qpcr不出来

引物是否涉及正确，反转录是否正确？

用的是加尾法还是茎环法？多试试调整下不同的参数，还有就是提取的时候得注意miRNA的得率

提RNA你会吧。。。 反转录你会吧。。。如果只是检测一般的mRNA的表达量 就用poly T反转录就可以了 如果是特殊的必须去另外合成特异引物 如果你想得到确切的浓度值 那必须在做RT的时候检测一个标准品 就是这里面东西的浓度你是确切知道的 然后做一条标准品曲线 然后拿你要检测的那个得到的值带到那个曲线里面就算出浓度了 大部分时候都是检测相对含量 就是这个mRNA在不同东西里面的比较 那就不用做标准品曲线 直接把得到的几个值比较下关系就可以了 大部分检测用的内参都是GAPDH 其他还有U6 U7可选

可能是你的核酸降解了，才会后续测不出来

我做micro的引物是直接找公司订的，逆转录用的日本牌子037A那个，没有出现什么问题。

保证PCR的温度合适，循环次数至少35个循环，应该是可以有结果的

其一是反义RNA与miRNA结合后，序列很短，导致Dicer酶（细胞内降解双链RNA的主角）不能有效结合；其二是miRNA与Ago2以RISC复合物的形式存在，该复合物也会导致Dicer酶无法高效结合。