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请教,为什么扩不出来

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1624
基因序列cds,引物,目的片段如下:
atggggacgccgggggaggggctg
301 ggccgctgctcccatgccctgatccggggagtcccagagagcctggcgtcgggggaaggt
361 gcgggggctggccttcccgctctggatctggccaaagctcaaagggagcacggggtgctg
421 ggaggtaaactgaggcaacgactggggctacagctgctagaactgccacctgaggagtca
                                                                             >>>>>>>>>>>

481 ttgccgctgggaccgctgcttggcgacacggccgtgatccaaggggacacggccctaatc
      >>> *****************************************

  541 acgcggccctggagccccgctcgtaggccagaggtcgatggagtccgcaaagccctgcaa
      ***********************************************************~Kbr_~H~M~2~1~Kbr_~H~M~2~1  601 gacctggggctccgaattgtggaaataggagacgagaacgcgacgctggatggcactgac
      ***********************************************************~Kbr_~H~M~2~1~Kbr_~H~M~2~1  661 gttctcttcaccggccgggagtttttcgtaggcctctccaaatggaccaatcaccgagga
      ********_~8lt~J~8lt~J~8lt~J~8lt~J~8lt~J~8lt~J~8lt~J~8lt~J~8lt~J~8lt~J~8lt~J~8lt~J~8lt~J~Kbr_~H~M~2~1                                                            aggtttacctggttagtggc
  721 gctgagatcgtggcggacacgttccgggacttcgccgtctccactgtgccagtctcgggt
  781 ccctcccacctgcgcggtctctgcggcatggggggacctcgcactgttgtggcaggcagc
  841 agcgacgctgcccaaaaggctgtccgggcaatggcagtgctgacagatcacccatatgcc
  901 tccctgaccctcccagatgacgcagctgctgactgcctctttcttcgtcctgggttgcct
  961 ggtgtgccccctttcctcctgcaccgtggaggtggggatctgcccaacagccaggaggca
  1021 ctgcagaagctctctgatgtcaccctggtacctgtgtcctgctcagaactggagaaggct
  1081 ggcgccgggctcagctccctctgcttggtgctcagcacacgcccccacagctga
   KEYS (in order of precedence):
~undefined****_target~Kbr_~H~M~2~1~8gt~J~8gt~J~8gt~J~8gt~J~8gt~J~8gt~J_left_primer_: ccacctgaggagtcattgc
<<<<<< right primer : aggtttacctggttagtggc
  Tm值60℃左右。PCR条件为:94℃,30S;55℃,30S;72℃,60S,35CYCLES.
没扩到目的片段,只有β-actin.
谁能帮我分析一下原因,谢谢!
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