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想请教大家提取miRNA的时候更倾向于选择茎环法还是加尾法?

相关实验:组织和细胞内miRNA丰度的检测实验

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燚s6YUV

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4 个回答

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baiselinge

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要求特异性高,检测miRNA比较相似,样品量充足,且钱多就茎环法。钱少就加尾,现在加尾法也有特异性比较高的试剂盒。

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Dr_劉医生

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两种方法都是miRNA反转的主流方法;茎环法,特异性略好,但每个miRNA都需要单独设计对应的茎环引物,较为繁琐。比较适合从多种样本检测单一miRNA。而polyA加尾法一次处理,可逆转录全部miRNA,只需设计后续特定的miRNA定量引物,即可选择性扩增想要miRNA。这个方式的通用性高,而且适合高通量检测。在miRNA的初步筛选中,加尾法方式较为优。当然经济,方便不在话下。所以看你具体目的

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毛利小五郎的徒弟

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看你的目的,茎环法在于特异性强,成本低。但是一次只能针对一种特定的miRNA进行检测,而加尾法则能够对miRNA进行批量筛选。

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bamboopiggy

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你说的是反转吧?提取miRNA,是用酚氯仿的方法,反转一般用茎环法

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