用HepG2 2.2.15细胞筛选抗乙肝药物

抗 HBV 药物的活性筛选选用 HepG2 2.2.15 细胞及 DHBV 阳性鸭血清感染北京芙蓉鸭两种模型，检测体外药物对病毒抗原表达的抑制作用、药物对鸭血清 DHBV DNA 的抑制作用。
体外抗 HBV 药效检测
材料与方法

1. 体外细胞模型: 乙型肝炎病毒（HBV）转染的 HepG2 细胞, 即 HepG2 2.2.15 细胞。
2. MTT法检测样品对细胞的毒性。
3. 酶联免疫法 (EIA) 检测样品对 HBsAg 和 HBeAg 的抑制作用。
4. 阳性药物对照: 拉米夫定（3TC）。
5. RT- PCR 检测 HBV-RNA/DNA

试验过程

1. 药物的细胞毒性检测HepG2 2.2.15 细胞在 96 孔细胞培养板中培养 48 小时后，加入不同浓度含药培养液，继续培养 9 天，用MTT法检测细胞存活率，确定药物对HepG2 2.2.15 细胞的毒性浓度。
2. 药物对 HBV 病毒抗原抑制作用检测HepG2 2.2.15 细胞在 24 孔细胞培养板中培养 48 小时后，加入无毒浓度下的系列浓度的含药培养液，继续培养，在培养第9天收集上清液，用 HBsAg 和 HBeAg 诊断试剂盒)检测 HBsAg 和 HBeAg。用 RT- PCR 检测 HBV-RNA/DNA 复制数。

体内抗鸭乙肝病毒（DHBV）药效检测

材料与方法：

1. 动物模型:北京芙蓉鸭。
2. 病毒: DHBV 阳性鸭血清。
3. 阳性药物对照: 拉米夫定（3TC）或自选对照药物。
4. 地高辛高引物 DNA 标记与检测试剂盒。

试验过程

一日龄鸭北京芙蓉鸭挑选阴性鸭经胫静脉感染 DHBV 阳性鸭血清，再筛选出 DHBsAg 阳性芙蓉鸭，给予药物，共给药 10 天，于第 5、10 天及停药后 3 天采血，用 southernblot 检测鸭血清DHBV-DNA 水平。根据病理切片观察肝脏病变情况。计算DHBV-DNA抑制%和肝病变抑制%，评估测试药物的抗病毒及减轻肝损的效果。

有人做过相同的实验模型，你直接下载看看：

陈宝敏,傅希贤. 2.2.15细胞株筛选抗乙型肝炎病毒药物的体外实验研究进展[J]. 中国中西医结合杂志,1997, (5):316-318.

可以动物建模，比如一般使用北京芙蓉鸭。