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科研学霸天团,48小时有问必答
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酶活检测
dxy_xextz7w2
可能反应时间不够,可以延长反应时间再进行测定
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问
血浆蛋白在此指什么而言?
loveliufudan
1. 在此背景下,血浆蛋白主要指参与炎症反应的各种蛋白质。这些蛋白质可能包括但不限于补体蛋白(一种参与免疫反应的蛋白质),凝血蛋白(如纤维蛋白),以及各种炎性因子和细胞因子(这些蛋白质在细胞之间进行信号传递,调控炎症和免疫反应)。2. 说到“血浆蛋白被激活”,这主要是指血浆中的某些蛋白质需要被激活才能执行其在炎症反应中的功能。例如,补体系统就由一系列在初始状态下是非活性的血浆蛋白组成。当发生感染或
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问
关于car表达的检测
huarenqiang5
这种情况不能用anti-mouseF(ab)'2来检测 car的表达。
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问
wb真的是玄学—wb条带不均匀
skyye
这个首先还是考虑是胶不均匀的问题。配胶时各成分需要充分混匀,配好胶后尽快使用,在4℃保存不超过一周
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问
WB内参
skyye
右边一组的情况我没遇到过,但确实每次上样前需要将样本在室温下充分溶解并短暂离心。左边一组的话,第二个和第三个样的内参不齐,也可能跟测蛋白浓度时没测准导致的
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问
总蛋白可不可以作为实验组?为什么
feixue7758527w
总蛋白也是可以作为实验组的,但是也要看具体时间的,要注意排除混杂因素的,其他条件要一致。
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问
细胞加药培养后有一块地方细胞死了,能直接提蛋白跑wb吗?
feixue7758527w
可以直接提取蛋白跑WB的,但是也要具体分析,排除污染导致死亡的。
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问
DSS蛋白多寡聚体实验
是TTT
准备蛋白样品:用反应缓冲液稀释蛋白样品。准备交联剂:用DMSO溶解配制DSS溶液。在蛋白样品中加入DSS交联剂:交联剂终浓度为0.25~5mM。反应溶液室温孵育0.5-1小时。淬灭反应:加入20~50 mMTris终止交联反应,室温静置15分钟。洗涤样品,进行WB实验。
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问
蛋白条带上有黑色斑点,请问是什么原因
loveliufudan
出现黑色斑点可能有多种原因。以下是一些可能的原因和解决方法: 1. 抗体反应:可能是一抗或二抗与非特异蛋白结合,或者抗体自身发生了过度聚集。解决方法可以尝试降低抗体浓度,或者缩短孵育时间。3天的一抗孵育时间可能过长,通常过夜孵育就足够了。 2. 封闭液:如果封闭液未能完全覆盖滤膜,或者封闭液中的牛奶粉未能完全溶解,都可能引起斑点。应确保封闭液的制备正确,使用新鲜的封闭液,且封闭时液体充分覆盖滤膜。
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问
请问这样的条带怎么改进 是组织蛋白样品 条带没有聚集在一起 不知道怎么回事 园里有大神知道吗
毛利小五郎的徒弟
考虑是蛋白组织有降解或者杂质,纯化一下在做吧
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问
做ELISA 能不能用96孔细胞培养板?终止液加多加少影不影响最后读数?
dxyc42u
96孔板有点小,后续实验难度大
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问
用pet32a载体表达的蛋白如何用肠激酶处理?
idiotOC0P
最近正好在做这个,我用的酶说明书是这样的体系
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问
wb实验在最下方loadibg处有条带,如何去除
loveliufudan
如果你在Western blot实验中发现一些不明的带,可能是由于一系列因素导致的,包括但不限于非特异性结合、蛋白降解产物、抗体的交叉反应等。以下是一些可能的解决策略: 1. 确认一抗的特异性:如果可能,尝试使用另一种一抗或者使用已知阳性和阴性对照来验证一抗的特异性。 2. 改变阻断条件:增加阻断时间,或者改变阻断液的组成。例如,如果你现在使用的是5%牛奶,你可以尝试使用5%BSA,或者使用含有T
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问
Meta 对数转换后的均值标准差
feixue7758527w
对数转化后的均数标准差是没办法进行meta分析的,还是要之前的原始数据进行分析的。以前有小软件能进行逆推的,但是现在都不能用了。
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问
求助‖SDS-PAGE蛋白电泳结果怎么看呢?细胞裂解泡的条带有很多条,有的只有一条的呢?
loveliufudan
在一条泳道上看到很多条带,可能表示裂解液中的蛋白质多样性比较高。每条带代表一种或几种分子量相近的蛋白质。带的明亮度通常与该蛋白质的浓度有关,更亮的带表示该蛋白质更丰富。如果在一条泳道上只看到一条带,可能有几种解释: 1. 这可能意味着裂解液中只有一种主要的蛋白质,或者所有其他的蛋白质都在检测限度以下。 2. 如果这是一个验证泳道,可能表明你的抗体非常特异,只检测到了你感兴趣的目标蛋白。 3. 如果
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问
求解答,加入IPTG诱导后,细菌增长十分缓慢怎么回事
huarenqiang5
考虑是你加的IPTG浓度过高所导致的。
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问
WB整个背景都是杂条带是什么回事嘞
feixue7758527w
我觉得你的样本首先要适度纯化。然后分离机胶可以换一个浓度试试。换成小浓度分离胶试试。然后洗脱时间加长一点。
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问
牛奶中的各种蛋白怎么测活性啊
loveliufudan
测量牛奶中蛋白质活性的具体方法将取决于这些蛋白的功能。比如,如果某个蛋白是酶,那么你可以通过测量它的催化活性(如衡量底物转化为产品的速率)来测定其活性。如果蛋白质具有结合活性,比如抗体或某些受体,你可以使用诸如ELISA之类的结合测定实验。在未知蛋白的情况下,可能需要借助蛋白质的已知信息,例如已发表的文献或数据库,来确定可能的功能测试。至于开发健康食品,你需要考虑以下几个步骤: 1. 确定产品的健
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基因预测是不是转录因子
loveliufudan
要预测一个蛋白质是否是转录因子,通常会根据其氨基酸序列中是否含有已知的DNA结合结构域。很多转录因子都包含某种类型的DNA结合结构域,例如锌手(Zinc-finger)、螺旋-环-螺旋(Helix-loop-helix)、螺旋-转子-螺旋(Helix-turn-helix)等。你可以使用以下步骤进行预测: 1. 首先,你需要获取你感兴趣的基因的蛋白质序列。这可以通过基因注释或者转录/翻译软件获取。
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求助,FBS灭活了十个小时还能用吗!
huarenqiang5
灭活10小时了不能用了,用的话会导致结果存在很大误差。
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