WB内参

右边一组的情况我没遇到过，但确实每次上样前需要将样本在室温下充分溶解并短暂离心。左边一组的话，第二个和第三个样的内参不齐，也可能跟测蛋白浓度时没测准导致的

蛋白量没有配平，抗体浓度有点高

上样量过多或者分离胶浓度过大或者样品有一点降解[笑哭R]

可能是由于样品融解效果不佳或分离胶浓度过大引起。建议：加样前离心；加适量样品促溶剂；电泳缓冲液时间过长，重新配制；降低凝胶浓度。