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关于car表达的检测

相关实验:表达蛋白检测实验

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dxy_elhdzv6w

查阅文献发现许多构建car的文献中检验car的表达大多用Fab流式检测,查了一圈发现在不同car靶标的文献中有使用相同的Fab抗体的情况,似乎这种抗体是种属特异的,而跟靶标scfv无关。请问是这样的吗?如果我的car靶标scfv段来自鼠抗人的抗体,那我能否用anti-mouse F(ab)'2来检测car的表达呢?

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3 个回答

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huarenqiang5

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这种情况不能用anti-mouseF(ab)'2来检测 car的表达。

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loveliufudan

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你的理解没问题。CAR (Chimeric Antigen Receptor) 是由多个部分构成的,其中的scFv(single-chain variable fragment)部分是用于识别靶标的。另一部分,即Fc(Fragment crystallizable region)部分,常常来自一种特定的物种,如小鼠。

在检测CAR表达时,通常使用抗-Fc抗体或抗-Fab抗体,而这个抗体是针对Fc部分(或Fab部分,包含了Fc部分的一部分)的物种特异性,而非针对scFv的靶标特异性。因此,不同的CAR表达研究可能会使用同一种抗-Fc或抗-Fab抗体进行检测,只要它们的Fc部分来自同一种物种。

对于你的情况,如果你的CAR的scFv部分来源于鼠抗人的抗体,那么你应该可以使用抗-鼠F(ab')2抗体来检测CAR的表达,假设你的CAR构建中的Fc或者hinge-CH2-CH3部分是鼠源的。但是,如果这部分是人源或其他物种的,那么你将需要找到相应物种特异的抗-Fc或抗-Fab抗体来进行检测。

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毛利小五郎的徒弟

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car一般建议用种属特异的,所以选择鼠抗人抗体的话,fab也是建议用小鼠的

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