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丁香通

WB整个背景都是杂条带是什么回事嘞

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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科研打工修勾

有老师帮忙看一下吗?

上样量是每个孔5ug蛋白

5%脱脂奶粉封闭一个小时

一抗说明书是1:2000~1:10000

选择稀释比例是1:8000;

TBST洗膜,洗5次,每次3分钟

抗体说明书的的条带位置在56kDa,实际做出来未见目的蛋白反而出现特别多的其他条带,

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4 个回答

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feixue7758527w

有帮助

我觉得你的样本首先要适度纯化。

然后分离机胶可以换一个浓度试试。换成小浓度分离胶试试。然后洗脱时间加长一点。

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huarenqiang5

有帮助

建议提高蛋白上样量在10ug以上试试。

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balalaLy

有帮助

蛋白上样量太低了,一般是10-20ug。另外,抗体的浓度可以再优化一下。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

可能是封闭不足,洗膜没洗干净,建议多封闭一下。

洗膜的时候多洗几次。

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