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科研学霸天团,48小时有问必答
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大肠杆菌的乳糖操纵子的疑惑,求大神帮忙解答😭😭
毛利小五郎的徒弟
你可以理解乳糖操纵子为调节代谢的一种酶,缺能量的时候增加。
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问
为什么要自己分析数据
毛利小五郎的徒弟
给到的差异基因只是一个开始,下游基因的表达等都需要自己去分析
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问
iptg配制过程中的注意事项是什么
毛利小五郎的徒弟
严格按照比例及无菌操作进行,iptg重要的是灭菌及保存,后续使用也要保证无菌。
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问
现拟将母亲pcr扩增产物通过酶切酶连与pUC18载体连接并转入dh 5a菌种中,求完整的实验方案
毛利小五郎的徒弟
设计质粒,质粒插入基因,然后转载,表达蛋白。
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问
硫酸铵沉淀
dxyc42u
白色的!而且是加着加着,突然就都析出来了
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问
想问一下,质粒发生降解后如果进行双酶切实验,可能会出现什么样的现象?
汤姆卜丽波
看降解的程度,有可能一条带都没得,也有可能很多杂带
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问
请问一下各位大神我的EMSA为什么只有DNA的量在明显减少但是看不到DNA和蛋白的结合条带?
毛利小五郎的徒弟
有可能存在多个复合产物所以你检测不到。
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问
如何判断一个菌能否使用CRISPR系统进行基因敲除?
毛利小五郎的徒弟
首先前提条件这个菌要有结构区域的外显子
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问
克隆启动子和目的基因,有那些载体?怎么选择载体
毛利小五郎的徒弟
①具有自主复制的能力;②携带易于筛选的选择标记;③含有多种限制酶的单一识别序列,以供外源基因插入;④除保留必要序列外,载体应尽可能小,便于导入细胞和进行繁殖;
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问
核酸染料会影响胶回收,为什么?
毛利小五郎的徒弟
会有一定影响的,染料中的染色成分会与胶中的大分子络合影响回收。
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问
为啥我测序4000bp的片段,两端能够测出来,中间3000bp测不出来啊
毛利小五郎的徒弟
测不出可能是因为基因片段太长或者其间包含的重复序列太多。
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问
双酶切插入目的基因的方向
周周zyl
双酶切插入目的基因的方向是反相的,多调整几次,应该就可以了,但顺序不能搞错。
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问
sto饲养细胞制作求助
huarenqiang5
考虑是:1 细胞营养条件不够,2 细胞被污染。
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问
除了simplot还有什么方法可以确定重组短点?
天一湖医者
还可以采用分片段构建ML进化树的方法确认。
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问
请问大家,为啥PCR产物电泳条带阴阳性是相反的?跑出来结果阴性比阳性还亮,我确定没有加错
Marchers
没见过条带出现阴阳相反的情况,可能原因是你电泳液ph有问题
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问
大肠杆菌图spec+的板子涨糊了。
Marchers
菌体死了后,收出来就是黏糊糊一团;还有可能是抗生素失效了,或者菌液太浓了也会导致板子糊糊的
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问
PCR产物电泳条带不见了,但是溴酚蓝还在胶的中下部。
毛利小五郎的徒弟
有几种可能首先,胶的方向没放对,有可能从侧面或者后面跑出去了。你再跑电泳时要确定梳子孔的方向要与电流方向垂直。其次,电泳时间过长。可以缩短电泳时间,或者做浓度更高的胶,比如1.5%或者2%的胶。第三,还可能是你的琼脂糖有问题。
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问
制备感受态一定要从挑单菌开始吗?
huarenqiang5
感受态制备时不是一定要挑单菌落,可以在活化好的平板上划一条线挑菌去小摇。操作时只要保证无菌就可以。另外,补充二楼的转化后挑菌:一定要挑单菌落,而且要利索,不能沾到周围培养基上的空白地方,因为如果不小心碰到,上面有很多连接产物及片段会随着进一步划线在新的培养基上积累,如果用pcr去筛选阳性,会有很多假阳性的。
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问
酶连接过程中,打开了PCR仪机盖会怎么样
毛利小五郎的徒弟
只是打开的外机器盖子影响不大,小心污染问题
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问
在质粒DNA提取实验结果中出现 A230为负数,A260/A280=3点多 有可能是什么原因?
毛利小五郎的徒弟
质粒提取的不够纯,有其他物质在干扰就会这样
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