关于细胞冻融处理的问题
百花香气茶气韵
我查到的资料有（冻融细胞）：
1、50冷冻，室温解冻，三次
2、在细胞沉淀中加入一定量的PBS（PBS的加入量根据所测指标的不同而有所改变，一般加入0.5ml，细胞密度不小于一百万个/ml），混匀，将细胞悬浮于PBS中，放低温冰箱中结冰，溶解，再结冰，再溶解，反复3次左右）。
但不知道有什么区别。各位前辈，我想问问，有没有在实践中好用的方法。
2 个回答
毛利小五郎的徒弟
第二种好一些，保持温度变化小一些，会提高复苏成活率
loveliufudan
细胞冻融处理的具体方法可能会因实验室条件、实验目的和细胞类型的不同而有所差异。以下是一些常用的方法：
50℃冷冻，室温解冻，三次
这是一种简单且常用的方法。将培养好的细胞收集后加入冷冻液（一般为10% DMSO和90% FBS混合），在-80℃冻存，解冻时放在37℃水浴中快速解冻。解冻后用完即可，不宜多次冻融。
PBS冻融法
该方法相对于50℃冷冻，室温解冻，三次的方法更加温和，不会对细胞产生过多的损伤。将细胞用PBS稀释至合适的细胞密度后加入冷冻液，冷冻液中DMSO的浓度一般为10%。然后将混合物分装到冷冻管中，-80℃冻存，解冻时放在37℃水浴中缓慢解冻。注意解冻过程中不要剧烈振荡。
冰醋酸法
该方法是将细胞用PBS稀释至合适的细胞密度后加入冷冻液（含10% DMSO），然后将混合物放在-80℃冻存，解冻时放在37℃水浴中缓慢解冻，解冻后加入等体积的冰醋酸（pH 3.0左右），将混合物放在-80℃冻存，再次解冻时放在37℃水浴中缓慢解冻。这种方法可以有效保护细胞膜，减少冻融过程中的细胞死亡率。
细胞冻融处理的方法选择主要取决于实验目的和细胞类型。在实践中，可以根据实验室的实际情况选择最适合自己的方法。另外，冻融过程中的温度、时间、细胞密度等因素也会对实验结果产生影响，因此需要根据实验要求进行优化和调整。
相关产品推荐
