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四环素诱导的tet on 系统如何过表达

相关实验:四环素控制系统诱导基因表达实验

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Pa27

我们构建了四环素诱导的tet on 

系统来诱导目的基因过表达,但是dox饮水与腹腔注射均不成功,不知是各种原因,(基因鉴定了小鼠是正确的)

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3 个回答

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sswei

有帮助

有两方面的原因,一个是表达载体的问题,另一个是表达受体的问题.载体可能出现的问题是发生突变或者被修饰导致启动子缺失或者位置发生改变.受体方面,受体的突变也可能导致无法表达。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

建议先验证表达是否成功,也就是是否有目的蛋白表达出来。如果有的话,考虑是小鼠应激的原因

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loveliufudan

有帮助

如果使用四环素诱导的Tet-On系统来诱导目的基因过表达不成功,可能有多种原因导致,以下是一些可能的原因:

Dosage不正确:Doxycycline (Dox)的剂量可能不够或过高,导致诱导不成功。建议重新调整Dox的剂量,以确保使用的剂量在适宜范围内。

给药方式不正确:Dox的给药方式可能不正确,例如,喂饲和注射的方式可能需要调整,或者需要更改药物的浓度或给药时间等。建议重新评估给药方式和条件。

遗传效应:目的基因的表达受到遗传效应的影响,例如,可能存在基因沉默或者剪切等问题。建议对目的基因进行更深入的研究,并确定基因的表达是否受到其他遗传或表观遗传的调控。

Tet-On系统的问题:Tet-On系统本身的问题也可能导致诱导不成功。建议检查Tet-On系统的质量和功能,以确保它能够正常工作。


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