【求助】mirna的抑制与过表达
丁香园论坛
7824
想做mirna的抑制和过表达,请问
1.过表达是否直接转
>ssc-let-7c MI0002445 stem-loop
UGUGUGCAUCCGGGUUGAGGUAGUAGGUUGUAUGGUUUAGAGUUACACCGUGGGAGUUAACUGUACAACCUUCUAGCUUUCCUUGGAGCACACU
2.抑制表达是否是上个stem-loop序列的反义
还是>ssc-let-7c MIMAT0002151
UGAGGUAGUAGGUUGUAUGGUU
的反义
谢谢
1.过表达是否直接转
>ssc-let-7c MI0002445 stem-loop
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2.抑制表达是否是上个stem-loop序列的反义
还是>ssc-let-7c MIMAT0002151
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的反义
谢谢
1.过表达:
想方便些,可直接购买miR人工合成拟似物,但作用时间可能较短;
也可以将前体miRNA及上下游百余bp的序列接入表达载体,再行转染。当然,直接做前体也可以过表达,但这么做的比较少。
2.抑制或敲减:
人工合成的有LNA,PNA,2-o-methyl及吗啉代等;
也可以用质粒或慢病毒过表达成熟miRNA的翻译序列,如“Sponges”策略,可在园内或pubmed上搜一下。
想方便些,可直接购买miR人工合成拟似物,但作用时间可能较短;
也可以将前体miRNA及上下游百余bp的序列接入表达载体,再行转染。当然,直接做前体也可以过表达,但这么做的比较少。
2.抑制或敲减:
人工合成的有LNA,PNA,2-o-methyl及吗啉代等;
也可以用质粒或慢病毒过表达成熟miRNA的翻译序列,如“Sponges”策略,可在园内或pubmed上搜一下。
非常感谢
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