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科研学霸天团，48小时有问必答

问做有荧光的慢病毒滴度，我在网上查到了两个方法，TCID50寻找CPE或荧光显微镜看最后一个孔荧光细胞数，为什么不用TCID50呢？

毛利小五郎的徒弟

因为TCID50的准确度不高，所以一般不选择。

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问求大佬解答！急求便宜的mtDNA损伤检测方法！

毛利小五郎的徒弟

检测前体rna的方法相对经济一些。

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问NCBI blast 提供的序列是DNA哪条链的序列？

毛利小五郎的徒弟

肯定是编码链，互补链是不作为ncbi模版的

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问乳腺癌骨转移的细胞系

huarenqiang5

包括zr-75-30，mda-MB-453，mgF-7，以及sk-br-3。

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问主成分分析

毛利小五郎的徒弟

利用一个样本进行主成分分析后所得到综合评分的中位数不可以作为判断一个疾病的指标，中位数只能辅助参考，不能做决定指标

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问怎么获取无菌的质粒

毛利小五郎的徒弟

可以进行灭菌的，变成无菌的质粒

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问肺组织制备单细胞悬液

huarenqiang5

细胞存活不受影响，胶原酶的活性不受影响。

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问T4 DNA连接酶错用成Gibson酶

毛利小五郎的徒弟

不可以了，重新连接吧，这种情况不能用了

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问Gibson酶能用作T4 DNA酶吗

申东熙老伯

应该是不可以的，这两种酶连接原理不一样。

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问想有偿求测定了滴度的呼吸道合胞病毒RSV,实在测不出来滴度，搞的焦头烂额

huarenqiang5

1 细胞基质的确定:建议选择Hep2 细胞作为病毒培养细胞基质。 2 病毒培养条件的确定：确定 RSV培养条件为 002 MOI接种,37 ℃吸附1~2h,弃病毒液,加入含 2%胎牛血清的MEM 病毒培养液 37 ℃,5% CO，培养7~9d，病变达70%~90%时收获病毒液,7d判定结果。提高滴度需要从筛选 RSV培养细胞基质、优化培养条件、确定病毒

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问网状meta分析求教学

Marchers

先把R的代码学会，其他就是找文献和数据分析了

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问EMSA

Marchers

EMSA肯定用试剂盒便宜些呀，3‘和5’都有，根据你探针来定，可以去NCBI查查

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问erastin失效

a807989061

铁死亡的主要机制是，在二价铁或酯氧合酶的作用下，催化细胞膜上高表达的不饱和脂肪酸，发生脂质过氧化，从而诱导细胞死亡；此外，还表现为抗氧化体系（谷胱甘肽GSH和谷胱甘肽过氧化物酶4-GPX4）的表达量的降低。可能是因为该诱导剂的稳定性问题，也有可能是因为实验条件的变化（例如，细胞类型、生长条件等）。确认实验的其他条件是否与之前的实验相同，包括细胞类型、生长条件、暴露时间、浓度等。考虑使用其他诱导剂进

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问制备组织匀浆

balalaLy

这要看你的实验目的是什么。如果是提蛋白一般用专门的裂解液，如果是用于检测酶活性或者其它一些成分，要根据后续实验所用试剂的要求，有些检测试剂盒可能pbs或生理盐水都可以，有些会有要求不能含有某些成分。

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问CRISPR/Cas9 基因敲除

loveliufudan

当设计CRISPR/Cas9基因敲除时，选择转录本是非常重要的。首先，需要考虑目标基因的功能，以确定要敲除哪个转录本。其次，需要考虑转录本的表达水平和分布，以确定是否能够有效地抑制目标基因的表达。NCBI和Ensemble是两个不同的数据库，可能存在数据不同的情况。在选择转录本时，应该查询多个数据库以确定转录本的准确性，并对所有结果进行评估。如果发现在NCBI上找到的最长转录本在Ensemble上

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问求助|流感病毒测序结果如何进行序列比对

毛利小五郎的徒弟

测序结果一共从NODE1-8，是将全部序列分成了8段来表示的

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问网状meta新手求大佬们回复

loveliufudan

如果只有A、B、C、D药物和安慰剂对比的随机对照试验，是可以进行网状Meta分析的。网状Meta分析是一种用于评估多项干预效果的分析方法，它将每项干预与其他干预进行比较，并用图形表示结果。对于一致性检验，可以使用I平方（I^2）统计指标来评估Meta分析中存在的差异。I平方可以评估试验间的差异是否可能是随机的，从而评估网状图的一致性。如果I平方值较高，则说明试验间的差异不是随机的，并可能需要进一步

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问meta分析求教学

loveliufudan

关于Meta分析中森林图中对照组的位置是否有要求，并没有明确的规定。然而，一般情况下，Meta分析中使用的森林图通常是将正向结果（即更大的效益或更小的风险）显示在图的左边，反向结果（即更小的效益或更大的风险）显示在图的右边。但是，最重要的是，森林图的图形应该清晰，易于理解，并且符合其他图形的通用惯例。

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问Meta分析有可能具有同质性么？

loveliufudan

Meta分析有可能是同质的，但I平方值为0%并不一定表明其具有同质性。I平方是一种度量研究间差异的统计指标，但它只能告诉我们研究间差异的大小，而不能说明其是否是同质的。因此，即使I平方为0，仍需进行异质性分析，以确保结果的可靠性和准确性。

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问求助 | 文章投稿页边距问题

loveliufudan

“本刊接受文本和表格的首选格式为Word DOC、RTF、XLS。也接受LaTeX文件。文本应在整个文件中双倍行距，左右边距最小为3厘米，顶部和底部边距最小为5厘米。文本应使用标准10或12磅字体。Word和（La）Tex模板可在我们的作者入口网站的稿件投稿指南页面上找到。”“最小为3厘米”意思是可以≥3厘米，你可以试着调整一下。

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