欧皇带给我好运
对肠道内容物提DNA,要对肠道菌群进行pcr绝对定量,看文章说用菌的16s通用引物扩增出目的片段,跑核酸胶,胶回收得出目的片段,然后合成质粒。但是问了质粒合成的公司,好像是需要提供菌的目的片段的序列,文章中只有引物,自己在ncbi上找片段,找的一头雾水,不知道改怎么检索,求求救救吧
晴空a
去PUBMED网站,在下拉菜单中选necleutide,进入genbank,然后后输入细菌的名称和16srRNA即可。
灵枢天问
额,你就直接搜菌种的名字然后再找16s
loveliufudan
对于肠道内容物中菌群的PCR绝对定量,你提到了使用通用的16S引物扩增目的片段,然后通过胶回收来获取目的片段并进行质粒合成。如果你需要获得菌群目的片段的序列来进行质粒合成,以下是一些可能的解决方案和建议:
1. 引物设计:在进行PCR扩增之前,你需要选择适当的16S引物。通常使用的通用16S引物包括V3-V4或V4区域的引物,例如341F和805R。你可以在文献中查找已经使用的引物或从已知的引物库中选择合适的引物。
2. DNA序列检索:要获得肠道菌群16S序列,你可以使用NCBI数据库或其他公共数据库(如Greengenes或SILVA)进行检索。在NCBI的核酸数据库中,可以使用关键词(例如"肠道菌群"、"16S rRNA"等)进行搜索,然后选择合适的序列。
3.序列分析:获取到16S序列后,你可以使用序列分析软件(如BioEdit、MEGA、CLC Genomics Workbench等)对序列进行处理和分析。你可以选择性地截取你感兴趣的区域(例如V3-V4或V4区域)作为质粒合成的目的片段。
4. 合成质粒:一旦你获得了目的片段的序列,你可以联系质粒合成的公司并提供该序列。质粒合成公司将根据提供的序列信息进行质粒的合成,并将合成的质粒提供给你。
土井挞克树
ncbi网站上输入菌的名字,会出现16s的信息,不需要提前输入
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