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科研学霸天团，48小时有问必答

问中药石见穿、马鞭草、忍冬藤、野菊花这四味中药在治疗盆腔炎的话适合醇提还是适合水提？如果适合醇提这四味药都是适合醇提嘛？

是TTT

适合醇提，水提效率会极低，都适合醇提的

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问枯草芽孢杆菌怎么转大质粒，一直转不进去？

不想干了Ush

我也是，请问楼主用的是化转还是电转，问题解决了吗？

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问刚果红平板鉴定纤维素降解菌

dxyc42u

如菌液边缘出现了反光圈，能说明降解了纤维素

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问【铁载体】CSA检测液与发酵上清液混合后沉淀是什么原因？

圆圆的原

我也是有沉淀，但是对照不加菌液就没有沉淀呀

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问为什么间二硝基苯需要纯化呢？间二硝基苯遇到氢氧化钾就显色了是怎么回事？还没加入雌酮就显色了，急求，🙏

毛利小五郎的徒弟

间二硝基苯遇氢氧化钾显色可能是间二硝基苯纯度不够，有杂质，正常是不变色的

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问求助mn-9d表达a突触核蛋白吗？

毛利小五郎的徒弟

mn-9d是可以表达a突触核蛋白的，可以做检测

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问棕榈酸怎么溶解？

毛利小五郎的徒弟

棕榈酸是一种脂肪酸，常温下为白色固体，不溶于水，但易溶于有机溶剂如乙醇、乙醚、氯仿、苯等。以下是几种常见的棕榈酸的溶解方法：1. 用热水浴加热。将棕榈酸放入烧杯中，加入适量的水，用热水浴加热至棕榈酸完全溶解。2. 用有机溶剂溶解。将棕榈酸放入有机溶剂中，如乙醇、乙醚、氯仿、苯等，搅拌均匀，待溶解后即可使用。3. 用碱溶解。将棕榈酸放入碱溶液中，如氢氧化钠溶液，加热搅拌，待棕榈酸完全溶解后，再中和溶

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问如何设计质粒求求各位大佬帮忙

sswei

采用重组酶构建质粒方法1. 载体的制备一般推荐双酶切线性化，线性化完全，假阳性克隆低。酶切体系。2. 对于使用重组方式连接来说，PCR 要设计引物, 设计引物时要根据质粒载体和基因序列选择合适的同源序列，通过 PCR 扩增方式进行连接，PCR 的产物要纯化。引物设计原则简单总结一下：（1）前向引物：5’ 端--上游克隆载体末端同源序列+基因正向扩增引物--3’ 端（2）反向引物：3’ 端--基因反

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问酵母里的脂肪酸代谢反应

sswei

脂肪酸从头合成的场所是酵母细胞液中进行。

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问氨基酸的提取及检测步骤

sswei

氨基酸的提取（可根据预实验结果适当调整样本量及比例）①细菌或细胞：离心收集细菌或细胞至离心管内，按照细菌或细胞数量（10⁴个）：提取液体积（mL）为（500-1000）：1的比例（建议500万个细菌或细胞加入1 mL提取液）处理样品，冰浴超声破碎细菌或细胞（功率20%或200 W，超声3 s，间隔10 s，重复30次），沸水浴提取15 min（密封以防止水分散失），冷却至室温后，4℃ 10000

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问中药红藤和败酱草治疗盆腔炎适合采用水提还是醇提？

loveliufudan

对于红藤和败酱草来说，主要的活性成分分别是氧化石蒜碱和败酱素。氧化石蒜碱是水溶性成分，更适合用水提取；败酱素是脂溶性成分，更适合用醇提取。但是具体到治疗盆腔炎，因为炎症反应主要是体内的免疫反应，不同的患者可能需要不同的药物成分来调控。因此，到底应该使用水提还是醇提，这可能需要考虑到患者的具体情况

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问siRNA敲降刺激后才升高的基因，什么时候加这个刺激，在转染siRNA同时，还是转染24到48h后。

loveliufudan

siRNA转染后通常需要一段时间（通常24-48小时）才能充分地敲降目标基因。因此，如果你想要在敲降后观察基因刺激的效果，你可能需要在转染siRNA一段时间后再添加刺激物。另一方面，如果你同时加入刺激物和siRNA，有可能在siRNA完全发挥作用之前，基因已经被刺激上升。这样可能会使得观察到的效果不准确。因此，通常建议的做法是先转染siRNA，等待24到48小时让siRNA发挥充分的敲降效果，然后

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问过氧化氢诱导建模应该怎么选购呢？

loveliufudan

一般来说，购买过氧化氢应该通过专业的实验室试剂供应商或化学品供应商进行购买，这些供应商提供的过氧化氢通常符合实验室安全标准，但是去药店买“双氧水”也是可行的。

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问小鼠鼠源性胰腺癌细胞皮下瘤，放疗增敏给多少剂量合适

feixue7758527w

放疗增敏剂一般都是按体重计算的，有的是5mg/kg，有的是870mg/kg，具体要看你用什么放疗增敏的。

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问pH 4.5的乙酸怎么配制？

sswei

如果用冰醋酸与氢氧化钠配制。PH=PKa-lg[HAc]/[Ac-]4.5=4.75-lg[HAc]/[Ac-]lg[HAc]/[Ac-]=4.75-4.5=0.25[HAc]/[Ac-]=1.78/1需要冰醋酸的质量为0.1×1.78/2.78×60=3.8克需要氢氧化钠的质量为0.1×1/2.78×40=1.4克将两者与水配制成一升溶液即可。

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问求助，BAF3悬浮细胞系进行质粒转染用啥转染试剂成功率高啊。

细水长流NAPI

我的经验是使用磷脂体转染试剂成功率能高一些

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问测定海参中的钒含量采用哪种方法比较好

毛利小五郎的徒弟

石墨炉原子吸收的方法比较精确，ICP-MS相对精准性差一些

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问求助🆘测定某种细菌对动物的半数致死量，应该怎么分组，怎么设置浓度梯度，每组的实验动物最少得多少只？

dxyc42u

分组就设置为正常对照和感染组，浓度可以参考文献中的，每组有四五只动物就行

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问咨询一下广大的网友，我接下来需要在秀丽隐杆线虫体内过表达自身的miRNA，如何选择载体？

dxyc42u

选择构建过表达质粒就可以了。。

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问蛋白质纯化洗脱中洗脱液的梯度如何操作

loveliufudan

“从0到400mM的递增NaCl溶液”的意思是用NaCl浓度从0mM开始，逐步增加至400mM的一系列NaCl溶液进行洗脱。这个操作通常是为了逐步改变柱子环境的离子强度，从而分级洗脱在离子交换柱上不同程度吸附的蛋白质。通常的方法是，首先准备一些NaCl溶液，如0mM、50mM、100mM、200mM、300mM、400mM等。这些溶液可以根据实际需要和实验要求准备。然后，你可以首先使用0mM的Na

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