蛋白质纯化洗脱中洗脱液的梯度如何操作

在AKTA选择收集那个栏里面选择那个带时间还有b从0到100那个选项，选择收集锋的大小，还有收集管的体积

“从0到400mM的递增NaCl溶液”的意思是用NaCl浓度从0mM开始，逐步增加至400mM的一系列NaCl溶液进行洗脱。

这个操作通常是为了逐步改变柱子环境的离子强度，从而分级洗脱在离子交换柱上不同程度吸附的蛋白质。通常的方法是，首先准备一些NaCl溶液，如0mM、50mM、100mM、200mM、300mM、400mM等。这些溶液可以根据实际需要和实验要求准备。

然后，你可以首先使用0mM的NaCl溶液洗脱柱子，收集洗脱液，之后再依次使用50mM、100mM、200mM、300mM、400mM的NaCl溶液进行洗脱，每次洗脱都要收集洗脱液。每个浓度使用的体积应是3.0mL。

这样一来，你可以得到一系列由不同NaCl浓度洗脱的样品，每种样品中包含的是在该NaCl浓度下能被洗脱的蛋白质。这种方法可以帮助你分离和纯化具有不同离子交换性质的蛋白质。

蛋白质的洗脱分为步进洗脱和梯度洗脱。步进洗脱时，每一阶段离子强度的增加不必一致，如用 NaCl 溶液洗脱时，可分三步洗脱，NaCl 浓度依次为：0.1 mol/L、0.5 mol/L、1.0 mol/L。梯度洗脱时洗脱液的离子强度是逐渐增加的，如将洗脱液中的 NaCl 浓度从 0.02 mol/L逐渐增加到 1.0 mol/L。

是分几个洗脱柱，第一个是0mm的nacl，最后一个是400mm的nacl，依此递增进行洗脱