细水长流NAPI
我的经验是使用磷脂体转染试剂成功率能高一些
loveliufudan
在进行BAF3悬浮细胞系的质粒转染时,选择合适的转染试剂是关键之一,可以影响转染的成功率。以下是几种常用的转染试剂,其成功率通常较高:
1. 磷脂体转染试剂(Lipofectamine)系列:Lipofectamine 2000、Lipofectamine 3000、Lipofectamine LTX等是常用的磷脂体转染试剂,适用于多种细胞系,包括悬浮细胞系。它们具有高转染效率和较低的细胞毒性。
2. 聚乙烯亚胺(Polyethyleneimine,PEI):PEI是一种阳离子聚合物,可与质粒DNA形成复合物,促进转染。PEI转染试剂在某些细胞系中表现出良好的转染效果,包括悬浮细胞系。
3. 电穿孔法:电穿孔法利用电场脉冲使细胞膜暂时变得可穿透,以实现质粒的转染。常见的电穿孔装置包括Electroporator和Nucleofector等,可用于悬浮细胞系的转染。
4. 病毒载体介导转染:使用病毒载体(如适合的 lentivirus 或 retrovirus)可实现高效的基因转染。这种方法需要构建适当的病毒载体并进行病毒包装,然后将病毒颗粒加入到细胞培养中进行转染。
dxyc42u
悬浮细胞不好转染,没有特别高效的,主要是摸索条件
huarenqiang5
可以用Hieff Trans试剂进行转染。
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