慢病毒文库感染293T细胞，怎么确定MOI=0.3?

MOI的计算方法：MOI值=病毒滴度（TU/mL）×病毒体积（mL）/细胞个数，你可以调整病毒的加入体积和细胞的个数，使MOI=0.3

查阅文献，获得目标细胞参考MOI值（如没有相关文献，则可首先设置较大梯度的MOI进行预实验）

MOI梯度设置

在查阅到的参考MOI值前后各设置2个梯度，每个梯度至少相差2倍，举例：查阅到某细胞系在文献中慢病毒MOI应用为10，则设置MOI梯度为2.5-5-10-20-40。

根据公式计算所需添加的病毒量：

MOI值=病毒滴度（TU/mL）×病毒体积（mL）/细胞个数

如果文献中找不到，可以通过实验来计算。

MOI:复感染指数，是指病毒对细胞的感染能力，MOI越高，细胞越难被感染。通常把某株细胞有80%被感染时所用的病毒颗粒数和细胞数目的比值作为该株细胞的MOI。

MOI=（病毒滴度×病毒体积）/细胞数目

选取预实验中细胞状态较好、荧光较多的孔对应的MOI值作为正式实验时使用的MOI值。

查阅相关文献，推荐查阅与目的细胞的种类、细胞状态、实验条件相似的有参考性的文献，对MOI值的适宜范围有基本的了解。

进行预实验，因慢病毒种类、实验条件、细胞状态、实验人员熟练程度等的不同，文献报道的MOI值也只能作为参考，推荐正式实验前在目的细胞中进行预实验（如梯度实验）来摸索合适的MOI值。