【求助】siRNA和质粒转染有何区别

请问各位：siRNA和质粒转染有何区别？
我最近在做siRNA使某个基因沉默，用的是santa的商业合成的siRNA，我导师想让我做质粒转染，我不知道这两者有何区别，目的不都是沉默某个基因表达吗？
请各位指教

希望各位高手指点小妹！我很迷茫

siRNA只能做瞬转，而用质粒的话可以建立稳转株。其目的都是沉默目的蛋白的。

差别就是这些吗？

转染是一种实验手段，就是把核酸转移进入细胞，sRNAi是把小RNA转染进入细胞，通常说的转染是将质粒转移进入细胞，只不过两者目的不同，sRNAi目的是沉默基因，通常说的转染是表达蛋白。

首先应该好好看看两者的定义。

我只有理论上说两句供你参考：

1、你可以直接转入合成的sRNAi片段，其实最初的sRNAi技术就是这么做的。但是这样的效率不高，且不够稳定。重复性差。条件苛刻，也就是不容易做好。
2、将sRNAi片段插入适当的质粒基因组中，让质粒将它带入靶细胞，因为质粒可以自行复制，入细胞后可以复制、表达自己基因组中的基因（包括插入的sRNAi），这样就可以使细胞内的sRNAi片段多起来，达到发挥作用的浓度。（虽然这个浓度不要求很高，但这种方式肯定比直接转染sRNAi片段多，且有效。）
3、将你的sRNAi连上质粒基因组后转进去表达（利用的这个质粒叫：载体），是长久还是瞬时？这要取决于质粒（载体）。严格的说除了立逆转录病毒载体，其他的都是瞬时的表达，细胞传代后均有可能消失。当做也不排除有较稳定的（在选择压力下，比如新霉素抗性等，或者营养依赖，选择等）。
4、利用质粒进行sRNAi，因为质粒上可能有标记，便于检测你的效果。

建议先理论弄明白，做的过程中出现问题便于分析。
另外，为何不直接问导师为什么呢？要不耻“上”问呀，学生问老师，有什么不好意思？

siRNA持续时间比较短，质粒的话就可以筛选稳定抑制的细胞系 了。
不过，我用稳定表达siRNA的质粒构建稳定细胞系，最后筛出来的抗药细胞只有两株目的基因被抑制到30%左右。
请问大家，目的基因未被抑制的那些细胞株，可不可以做为我的抑制株的对照？按道理来讲，应该用稳定表达随机siRNA的质粒同时构建稳定细胞系，做为我的对照。现在重新单独构建对照细胞系可以吗？

楼上说的很对

商业合成的siRNA是用化学方法直接合成的，通常就是一对大概23bp的双链RNA，它可以在细胞内诱导接连成小RNA 即我们常说的沉默RNA，用于直接沉默目的基因的转录体，迅速高效但是沉默时间是瞬时的，而用质粒载体时，需要构建表达载体，载体上选择合适的启动子，报告基因 和有效的沉默序列是必要的。表达载体一般能在细胞内或体内稳定存留一段时间。可以稳定表达沉默片段，从而达到沉默基因的目的。

一个是RNA一个是DNA， sirna的 功能是有一定时限的，不可能长时间 时限沉默功能，而质粒转然之后 只要不出现质粒丢失现象是可以长时间实现功能的，另外 他们两个的转染试剂可能也不同，一般 siRNA有专门的 特异性转染试剂，目的是为了实现更高的转染效率

学习了

学习了。请问有谁做过结肠癌细胞株HCT116的质粒转染吗？一般优化条件是多少？

用siRNA 就只能做到瞬时干扰掉靶基因， 没做一次实验都要干扰一次 但是不能保证你每次的干扰效率都比较好 所以就做后续的实验就比较麻烦，而用shRNA 也就是构建到载体中的siRNA就可以用来构建稳定株 做后续实验也会方便稳定些 并且做的实验的范围就会更广些，比如用来包装病毒然后做动物实验啊 等等 这就要根据你的后续实验需要了

那转染方法有什么区别呢？

学习了。。。