悬浮细胞如何进行传代?
丁香园
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由于细胞已经在生长培养基中悬浮,所以无需酶的作用使其从培养容器表面脱离,方法简单。
材料准备:
1、装有悬浮细胞的培养容器。
2、完全生长培养基,预热至 37℃。
3、37℃ 培养箱,充有二氧化碳浓度为 5% 的湿化空气。
传代流程:
一、直接传代法
1、待悬浮细胞长满至 80%~90%(细胞悬液变黄),即可传代;
2、用吸管吸弃细胞悬液 1 / 2~1 / 3;
3、加入适量的新鲜培养基,继续培养。
二、离心传代法(在发现有细胞碎片的情况下)
1、将细胞悬液转移到离心管内;
2、150 g 离心 5 min,弃去上层清液;
3、使用新鲜的培养基重悬细胞;
4、吸管吸取适量细胞悬液,装入新的培养瓶,再加入适量的新鲜培养基,继续培养。