王小二HIF5
想问一下,某个基因本身表达量很低,需要刺激后表达量高,想用siRNA敲降这个基因,我可以在转染siRNA同时加刺激(因为本身表达低,在刺激后才会升高),还是在转染24到48的时候再刺激,这个基因仍然不会上升?提前谢谢大家的回答。
loveliufudan
siRNA转染后通常需要一段时间(通常24-48小时)才能充分地敲降目标基因。因此,如果你想要在敲降后观察基因刺激的效果,你可能需要在转染siRNA一段时间后再添加刺激物。
另一方面,如果你同时加入刺激物和siRNA,有可能在siRNA完全发挥作用之前,基因已经被刺激上升。这样可能会使得观察到的效果不准确。
因此,通常建议的做法是先转染siRNA,等待24到48小时让siRNA发挥充分的敲降效果,然后再添加刺激物。这样可以更准确地观察在基因被敲降后刺激的效果。
土井挞克树
一般是转染sirna24h后,再加刺激
汤姆卜丽波
我认为更有说服力的操作是转染后24h再刺激,表明你确实敲低了。
dxyc42u
提前一天加刺激比较好些,毕竟基因表达需要时间
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