龙大人驾到
在进行siRNA转染后的24小时内,通常无法直接从细胞中提取足够的RNA用于下游分析。这是因为siRNA转染后,siRNA需要一定时间才能进入细胞并发挥作用,以降低目标基因的表达水平。此过程需要一定的时间,并且目标基因的降低可能需要更长的时间才能观察到。
通常,在进行siRNA转染后,需要等待一定的时间(通常是24至72小时)以使siRNA充分发挥作用并降低目标基因的表达。这样,细胞中的RNA水平才会受到明显影响。因此,24小时后提取RNA可能无法反映siRNA转染对目标基因表达的影响。
如果你希望在24小时内评估siRNA转染的效果,可以选择其他方法,例如实时定量PCR(qPCR)或免疫印迹等,来检测目标基因表达的变化。这些方法可以更快地检测到转染后的效果,并在较短的时间内提供结果。
然而,如果你需要评估siRNA转染对RNA水平的影响,建议等待更长的时间(通常是24小时以上)来确保siRNA充分发挥作用,并在细胞内观察到目标基因表达的下降。最佳时间点可能会根据目标基因和细胞类型的不同而有所变化,因此建议进行一些时间点的试验,以确定最适合你的实验条件的时间点。
skyye
可以的,siRNA一般转染24-48h后就可以提RNA,48-72h可以提取总蛋白,以检测转染效率
sswei
一般在siRNA转染后24小时后即可检测到靶mRNA水平的降低,可采用细胞总RNA提取,全长cDNA合成,荧光定量实验即可检测到mRNA 的敲除效率。
Dr_劉医生
太短了,一般在转染6小时后更换培养基液体,完全培养48小时后对转染细胞提取RNA。
土井挞克树
可以的,24h之后就可以提取rna了
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