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【求助】siRNA转染细胞

丁香园论坛

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各位老师,我现在做sirna转染细胞,有个问题一直很迷惑,我查资料说脂质体2000转染4-6h后可换成含血清培养基,不影响转染效率,但是换液之后的新长出来的细胞里也含有sirna吗?
该转染的能转染的已经转染了,所以换液没影响。
新细胞里没有,换液只是调整转染后细胞的生长状态,避免对细胞的伤害。
细胞版正在进行siRNA转染答疑,可以去看看

firebaby2007 wrote:
新细胞里没有,换液只是调整转染后细胞的生长状态,避免对细胞的伤害。
新细胞里应该有吧,这种抑制效应可以传给子代的,只不过在细胞中的浓度会有所降低。总的来说应该能够持续发挥抑制效应的

sirna转染细胞,是一时效果,一般从24-72小时;不能传递给子代细胞。

首先:楼主应该分清这几个区别:RNAi分为:siRNA, shRNA, miRNA
转染kit很多,根据siRNA的排列和对不同细胞转染效率不同:查10---100倍
例如:invitrogene 2种kit都可以,Lipofectamine RNAiMAX(针对:siRNA,不能用于plasmid转染);Lipofectamine 2000(DNA, siRNA);Lipofectamine LTX(针对:DNA)

转染效率决定于:
1细胞状态
2siRNA量以及同时导入DNA的量和品质
3转染kit和方法

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师兄微信号:shixiongcoming

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