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科研学霸天团，48小时有问必答

问关于乙酰CoA请求生化大佬解惑！！

dxyc42u

细胞质中的乙酰CoA能通转运到细胞核

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问信号通路与时间点的关系

dxyc42u

这与刺激因素的作用持续时间有关。

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问实验操作求助

a807989061

甲醇是指无水甲醇。甲醇-乙酸固定液是实验室常用的固定液。固定时间15分钟至24小时，冰箱、室温均可。必要时可改变甲醇和乙酸的比例，乙酸比例增加，利于细胞膨胀、染色体铺展，但易导致细胞破裂、染色体散失。甲醇-乙酸固定液(3:1)主要由甲醇和乙酸混合制得，用于固定多种组织。

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问放线菌平板对峙实验有效果，而发酵液没有效果怎么回事儿

毛利小五郎的徒弟

先排除一下发酵液污染吧，如果存在污染一般实验效果不好。

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问滑膜间充质干细胞培养用一般的DMEM+胎牛血清培养基可以吗?外泌体提取的合适浓度是?

dxyc42u

我们实验室有人就用国产的养，要是状态不好的话可以换成进口的

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问想问大家，共培养模型和transwell小室具体是什么区分？

loveliufudan

共培养模型和Transwell小室是两种不同的细胞培养方式。共培养模型是在同一个培养容器中同时培养两种或多种细胞类型。在共培养中，细胞可以直接接触，相互作用，并在相同的环境中生长。这种方式在研究细胞间相互作用和相互信号传导方面非常有用。Transwell小室是一种阻隔性细胞培养方式，其中细胞生长在一个透明的细胞培养膜上，形成一个活细胞膜。这种方法用于研究细胞间的通透性和细胞间的通讯，也可用于研究细

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问大鼠是否需要禁食取粪便，代谢组学

毛利小五郎的徒弟

建议禁食后取粪便，排除进食的影响。

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问脂肪乳注射液的滤膜选择

龙大人驾到

通常在做HPLC分析时，脂肪乳注射液试剂都需要经过过滤，以确保试剂质量和准确性。在选择滤膜时，一般建议选用有机系滤膜，因为脂肪乳注射液试剂本身是有机溶剂系的，使用有机系滤膜可以有效避免试剂的反渗透。但是还是要根据具体的试剂和分析要求来决定使用哪种滤膜，以保证最佳的分析结果。

4 回答62 围观

问所克的基因的CDs为950bp左右，上下游引物的Tm值为56.4—59.9，用Taq酶克，试了多个温度梯度克不出来，求合适的温度

龙大人驾到

Taq DNA酶的活性范围一般介于55-72℃，温度过低、过高都会对酶绒毛发挥作用产生不利影响，因此应选择合适的温度，分子量较大的基因应优先选择较高的温度，而对于950bp左右的基因，选择合适的温度一般应保持在62-65℃，以便获得最佳的PCR扩增效果。

3 回答80 围观

问引物探针检测低浓度样本不稳定，并且检测浓度与真实浓度相比忽高忽低，这种情况下该如何优化？使反应体系更稳定。

毛利小五郎的徒弟

增加稳定剂，选用成熟的试剂会稳定体系。

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问实验操作求助

毛利小五郎的徒弟

是的，配方中的甲醇是指无水甲醇。

3 回答76 围观

问sci查重需要将参考文献作为文本放入文章结尾吗？以及表格中的备注需要一并查重吗，谢

毛利小五郎的徒弟

需要的，参考文献不纳入查重范围

3 回答80 围观

问保护性因素和危险因素联合做二元logistic回归和roc曲线该怎么做？

毛利小五郎的徒弟

不建议直接做roc曲线，roc在截止值的特异度预测还不错，但是之外的预测率可仅供参考

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问期刊推荐求助

毛利小五郎的徒弟

Journal of Cystic Fibrosis这个不错

3 回答47 围观

问请问各位大佬，药学的什么期刊什么类型比较好投，论文小白

龙大人驾到

"British Journal of Clinical Pharmacology"，"Journal of Pharmaceutical Sciences"，"Pharmacology & Therapeutics"

4 回答270 围观

问NCBI里面怎么搜一种菌的所有信号肽

龙大人驾到

访问 NCBI 的官网（www.ncbi.nlm.nih.gov）。点击顶部的“搜索”标签，然后在搜索框中输入该菌的完整名称或简称。选择“生物序列”作为搜索类型，然后点击“搜索”按钮。筛选结果，找到该菌的基因组数据库。进入该基因组数据库，查看该菌所有基因的列表。使用“信号肽”作为关键词在基因列表中搜索，找到所有包含信号肽的基因。查看每个基因的序列详细信息，提取信号肽序列。如果没有找到满足要求的信息

3 回答82 围观

问蛋白标签

龙大人驾到

可能有如下几方面的问题蛋白质表达水平过低：如果蛋白质的表达水平很低，那么Flag标签就可能很难被检测到。1.Flag抗体效仿不足：Flag抗体可能不够敏感，导致Flag标签没有被检测到。2.Flag标签不稳定：Flag标签在表达和纯化过程中可能不稳定，导致在Western blot实验中没有被检测到。3.Western blot技术问题：有可能是技术问题，例如抗体稀释比例不合适，板材过于热或者环境

3 回答72 围观

问求助想验证多糖和细胞膜上蛋白结合可以用什么方法

龙大人驾到

3 回答62 围观

问【SOS】转染实验实在是搞不出来😭

毛利小五郎的徒弟

你的试剂没有问题，考虑还是时间不合适，可以验证一下时间的适应性。

3 回答225 围观

问小鼠光遗传病毒注射？正常病毒和cre病毒的区别

loveliufudan

正常病毒和cre病毒的区别在于cre病毒通过把某些特定基因的表达删除，用于调控特定基因的表达。相比之下，正常病毒是在细胞中直接表达某个基因，不需要进行其他的基因操作。两种方法的区别在于，第一种方法是直接对普通C57小鼠注射，第二种方法则先对小鼠进行了一次基因调控操作。因此，第二种方法更灵活，可以在表达的基础上进行更多的操作，但同时也更复杂。

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