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Tran screener CD73实验，最后的结果怎么处理呀
毛利小五郎的徒弟
得到CD73分泌的阳性结果后，可以做荧光染色定位，查看定位情况。
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问
请问这个破骨细胞诱导成功了吗？
sswei
诱导成功的破骨细胞为可见单个核细胞融合成多核细胞，TRAP染色可见多数细胞胞浆呈酒红色。因该镜下呈酒红色胞浆的细胞数太少，所以诱导欠成功。
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问
做韭菜叶片的石蜡切片在脱蜡复水过程中出现了脱离玻片是因为什么啊？
毛利小五郎的徒弟
脱片是因为脱水过度了，减少脱水时间。
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问
基因过表达后，相关的表型结果，过表达株比空载株高，二者有统计学差异。但未到野生株水平，这个应该怎么解释呢？
loveliufudan
基因过表达可以导致表型的变化，但是基因表达水平的高低并不是唯一影响表型的因素，还可能受到其他基因、环境和遗传背景等因素的影响。因此，即使基因过表达株比空载株表现出显著的表型差异，也不一定能够达到野生型的表型水平。这种现象可以通过以下几种方式来解释：基因过表达只是表型变化的一部分：在自然界中，很少有单个基因能够完全控制某个表型的发生，表型通常受到多个基因的影响。因此，即使某个基因过表达，也不能保证该
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问
从细胞中提取外泌体的实验，一般需要养多少细胞再进行提取分离比较合适
毛利小五郎的徒弟
一般需要养10x7左右的细胞再分离提取
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问
做sdspage的时候上层蛋白质条带总是会消失，有没有大神能帮忙看一下会是什么原因导致
毛利小五郎的徒弟
我之前也经常出现锯齿，后来发现是蛋白降解了，你可以跑个电泳验证一下
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问
碧云天的茜
毛利小五郎的徒弟
c0148是专门检测成骨细胞的，c0138检测干细胞显色好
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问
求助：小鼠MCAO模型
毛利小五郎的徒弟
1.选用柔韧度合适的线栓2.选择线栓型号要与老鼠体重相配。每个地区的老鼠有差异，所以要做预实验，根据预实验结果来选择合适型号线栓。3.插破的情况下，也可以根据插破点来找到合适型号线栓。
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问
Transwell小室侵袭与共培养问题
毛利小五郎的徒弟
可以共同培养，自己收的细胞要放在上室。
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问
如何检测标本中某基因或蛋白的含量
毛利小五郎的徒弟
可以做rt-pcr，来检测rna的含量。然后做qpcr来定量分析rna
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问
观察拟南芥的表型，其中要求计算拟南芥的萌发率，那在一天的什么时候数拟南芥的萌发数最好呢，还是一天多数几次，分早中晚
sswei
拟南芥在发芽过程中，它要求合适的温度（22-23℃）、光照、光周期、湿度。并且要求打破休眠。上述影响因素中，光照和湿度是2个必需的条件。在种子发芽的过程中，如果种子被土壤遮盖而不能见到阳光则种子不能发芽。所以，在计萌发数时宜白天为佳，每天白天固定时间数3次。
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问
求问大神角膜上皮细胞怎么提取，培养？
毛利小五郎的徒弟
培养基：无血清角质形成细胞培养液，添加0.15mmol/L 钙、0.1ng/ml 人上皮生长因子、5mg/ml 胰岛素、0.5mg/ml 氢化可的松和30mg/ml 牛垂体提取物；MEM；PBSA；胎牛血清
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问
降解TLR4实验所用的LPS刺激时长大家都是多久？然后孵育PROTAC时长又是多久？
毛利小五郎的徒弟
lps一般的刺激时长为3-5h。
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问
请问牙龈卟啉单胞菌的浓度与od值关系？
sswei
一般OD600=1时对应的细菌浓度为undefined10^9cfu/ml。
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问
分子克隆测序都是载体的的序列？
毛利小五郎的徒弟
说明载体没连接或者载体脱离了，需要重新连接
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问
实验中用到的buffer的配置详细是什么试剂进行配置，以及蛋白含量和对应磁珠用量的具体比例是什么？
毛利小五郎的徒弟
buffer的配置有很多种方法，可以参考下表
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问
一个基因有三个转录变体，克隆基因时会对测序结果造成影响吗，影响克隆基因吗
huarenqiang5
一个基因有三个转录变体时可以用以下两种方法进行基因测序： 1.设计CDS引物，通过提取组织RNA，并设计相应引物，运用PCR的方法获得目的基因CDS序列，连接到克隆载体后，挑取单克隆进行测序。这种方法相对成本较低，但是PCR过程可能引入突变。适合基因CDS序列较短的情况。 2.全基因合成：根据目的基因的CDS序列，直接交给公司设计合成目的基因。此方法优点准确
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问
小鼠腹部皮肤缝合后缝线被咬掉有什么办法，需要再次补缝合好么？再次缝合需要再次麻醉么？
Ckkdien
防止小鼠撕咬缝线目前最好用的是实验鼠专用伊丽莎白圈，参考文献中mice were housed individually and fitted with Elizabethan Collars（E-collars）（Kent Scientific Corporation）to prevent bitinf of sutures.国内也有生产的，网上有佩戴方法的视频教学。最好是再次麻醉后补缝合。
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问
根系泌氧（rol）具体测定方法
sswei
柠檬酸钛液体的制备方法，包括以下步骤：S1.烧杯中加入蒸馏水，将柠檬酸倒入烧杯中，并同时搅拌，至柠檬酸完全溶解，再 向该溶液中滴加四氯化钛盐酸溶液，同时搅拌，保持烧杯内的温度在25℃，连续搅拌20分 钟；S2.向S1中的烧杯内加入氯化铁，搅拌2分钟后加入氯化锌，再次搅拌2分钟后加入 二氧化锰，再搅拌2分钟后加入硼酸，搅拌2分钟；S3.向配置好的溶液内缓慢加入乙醇，搅拌，不定时的使用pH剂检测溶液的
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问
薄膜水化法制备聚合物囊泡，在水化过程有絮状物析出，有什么解决办法吗？
sswei
生成成沉淀原因大约是因为甲醛与聚乙烯醇发生分子间的缩醛反应，使原本线性的聚乙烯醇变成T型交联，分子量变大而沉淀出来，而缩醛，办缩醛的反应是可逆的，并不稳定。只有相邻的两个羟基与甲醛形成的五元环状缩醛才稳定，而这样的产物是线性的，加上众多的羟基，醚键都是亲水基，溶水性好。因此，析出的沉淀会逐渐解去不稳定的T型交联，变成线性的，相邻五元环的可溶性聚合物，又会溶解。
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