Transwell小室侵袭与共培养问题

可以共同培养，自己收的细胞要放在上室。

体外细胞共培养（co-culture)是将两种细胞（可以来自同一种组织，也可以来自不同的组织）混合共同培养，从而使其中一种细胞的形态和功能稳定表达，并维持较长时间。该技术能模拟体内生成的微环境，便于更好地观察细胞与细胞、细胞与培养环境之间的相互作用以及探讨药物的作用机制和可能作用的靶点，填补了单层细胞培养和整体动物实验的鸿沟。

细胞共培养分为直接接触式共培养和非直接接触式共培养。直接接触式共培养是指在合适的条件下，将两种细胞按照一定比例在同一培养皿中共同培养。利用两种细胞或组织接触，通过旁分泌、自分泌分泌细胞因子或直接接触等相互作用方式，主要缺点是两种细胞分离较困难，不便于观察和后续检测；非直接接触式共培养是指在共培养体系中一者对另者的影响是通过旁分泌的细胞因子相互作用，但两者不接触。由于两种细胞容易分离，便于观察和不影响后续的检测，包括以下4种方法：（1）用一种细胞的培养上清液（含有不同生长因子）与另外一种细胞共培养。（2）将玻片上（经过1型胶原凝胶预处理）培养的细胞B，以一定的比例放入细胞A的培养皿中与其共培养。（3）Millicell插入式细胞培养皿（Transwell小室）是一类有通透性的杯状装置，杯子底层放一张有通透性的膜，一般常用的是聚碳酸酯膜，孔径大小有 0.1～12.0um。将 Transwell 小室放入培养板中，细胞A种在上室内，下层种植的细胞B 其培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，从而可以研究细胞B分泌或代谢产生的物质对细胞 A 的影响。（4）三维细胞培养(three dimensional cell culture,TDCC)：TDCC是将具有三维结构不同材料的载体与各种不同种类的细胞在体外共同培养，使得细胞能够分化产生一定的三维组织特异性结构，构成三维细胞载体复合物,如现在常用的基质胶 (matrigel)，是一种从小鼠肿瘤组织中提取的物质，在室温下，它形成类似于体内的细胞外基底膜的胶状结构，把内皮细胞培Matrigel胶内，内皮细胞表现出新生血管的特征。Matrigel胶方法的局限性是并不能很好模仿体内肿瘤和血管内皮的微环境，细胞分离及提取困难，而且细胞因子的弥散受到一定的影响。

根据您的描述，中间使用的膜的孔径为8um，该孔径的大小比许多细胞因子要大，因此理论上不应该透过膜。然而，一些小分子物质和离子可能会透过8um的膜，所以要根据具体情况进行判断。如果您担心中间膜会影响实验结果，可以考虑使用更小的孔径，如0.4um的膜。但请注意，使用不同的孔径可能会影响实验条件和结果，需要谨慎设计实验。

关于共培养实验中不同的细胞培养基，通常应该将下室中的细胞培养基含有高浓度血清或其他血清补充物，以促进细胞的生长和增殖。如果您使用的细胞类型需要特殊的培养基，可以考虑将需要特殊培养基的细胞放置在上室中。在共培养实验中，上下室的培养基可以通过中间的膜进行交换和共享，但如果您担心共培养会影响实验结果，可以考虑分别培养不同的细胞类型并进行独立的实验。