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本人小硕一枚,临床工作10年了目前面临科研压力,有个困惑请大神解答一下,临床上接触到很多切除的肿瘤组织,如胃癌、结肠癌,如要检测结肠癌组织中某RNA或某蛋白与正常组织中含量是否存在差异,该如何检测呢?具体技术是怎样的?感谢各位的解答
毛利小五郎的徒弟
可以做rt-pcr,来检测rna的含量。然后做qpcr来定量分析rna
sswei
RNA的检测即RT-qPCR,包括三大步骤:RNA的提取与浓度测定、逆转录为cDNA、以及实时荧光定量PCR实验。
loveliufudan
您可以通过以下步骤来检测肿瘤组织中某RNA或某蛋白与正常组织中含量的差异:
收集样本:收集足够的正常组织和肿瘤组织样本,并进行组织切片。
RNA/DNA提取:从切片中提取RNA或DNA,并进行质量和浓度检测。
逆转录:对RNA进行逆转录,将其转化为cDNA。
实时定量PCR:使用实时定量PCR技术检测不同样本中目标RNA或DNA的含量。您需要设计适当的引物和探针,以确保特异性和灵敏度。
免疫组化:对切片进行免疫组化,使用特异性抗体检测目标蛋白的表达水平。
其他技术:您还可以使用其他技术,例如Western blot或基因芯片技术,来检测目标蛋白或RNA的表达水平。
总之,您需要选择适当的技术,并进行合理的实验设计,以确保结果的可靠性和可重复性。同时,还需要注意样本处理和实验条件的标准化,以避免误差的引入。
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