根系泌氧（rol）具体测定方法

柠檬酸钛液体的制备方法，包括以下步骤：

S1.烧杯中加入蒸馏水，将柠檬酸倒入烧杯中，并同时搅拌，至柠檬酸完全溶解，再 向该溶液中滴加四氯化钛盐酸溶液，同时搅拌，保持烧杯内的温度在25℃，连续搅拌20分 钟；

S2.向S1中的烧杯内加入氯化铁，搅拌2分钟后加入氯化锌，再次搅拌2分钟后加入 二氧化锰，再搅拌2分钟后加入硼酸，搅拌2分钟；

S3.向配置好的溶液内缓慢加入乙醇，搅拌，不定时的使用pH剂检测溶液的pH值， 待溶液的pH值为2时停止加入乙醇，停止搅拌，静置2小时；

S4.将S3中静置好的物体使用抽滤瓶进行抽滤，得凝胶状物体，将所得凝胶状物体 用浓度为20％的乙醇溶液洗4次；

S5.将S4中的洗好的凝胶状物体放入烘箱中，在50℃之间，烘22小时；

S6.将S5中的固体取出加入蒸馏水，搅拌均匀，保持室温；

S7.将S6中的液体装瓶密封，并置于低温干燥处保存。

比色法是以生成有色化合物的显色反应为基础的。一般包括两个步骤：首先是选择适当的显色试剂与待测组分反应，形成有色化合物，然后再比较或测量有色化合物的颜色深度。

湿地植物根部的泌氧量均利用柠檬酸钛比色法测定和计算.通过柠檬酸钛浓度与吸光度的标准曲线计算出各实验组的柠檬酸钛浓度后，分别用以下公式计算泌氧量，根系泌氧测定的全过程均在无氧的操作箱中进行。

ROL=c(y-z) (1)

RroL=c(y-z)/g (2)

式中，ROL为泌氧量(umol O2/(株·d))，RroL为泌氧率(umo O2/(d·g(DWroot)))，c为加入每个试管的柠檬酸钛的起始体积(L), v为对照组柠檬酸钛溶液的浓度(umol/L)，z为放入植物6h后柠檬酸钛溶液的浓度(umol/L)，g为用于测定泌氧的根系干重(g)。

根系泌氧（Root Oxygen Leakage, ROL）是一种衡量植物根系细胞膜损伤程度的指标，通常用于评估植物的耐逆性。以下是ROL的测定方法：

取植物根系：从植物中取出根系，并用水冲洗干净。

预处理：将根系放置于含有氧气的缓冲液中（例如10 mM MES/KOH pH 6.0），室温下预处理20-30分钟，使其适应新的环境。

开始测定：将根系放入预处理好的缓冲液中，并用磁子搅拌器轻轻搅拌。用氧气电极测定缓冲液中的氧气含量，记录下初始值。

破坏细胞膜：将缓冲液加热到95℃，维持5分钟，使细胞膜完全破坏。

再次测定：再次用氧气电极测定缓冲液中的氧气含量，记录下此时的值。

计算ROL值：ROL值等于第5步中测定的氧气含量减去第3步中测定的氧气含量。

柠檬酸肽比色法是一种用于测定蛋白质含量的方法，常用于分离提纯后的蛋白质纯度测定。以下是具体操作流程：

准备标准曲线：取一定量的已知浓度的蛋白质标准品，将其稀释成不同浓度，取不同浓度的标准品制成一系列的标准曲线。

取样：取适量的蛋白质溶液加入适量的冷醋酸，使蛋白质沉淀。

溶解：加入适量的5%的三氯醋酸，混匀，使蛋白质溶解。

加试剂：加入冷的10%的三氯化铁溶液，混匀。

等待反应：静置10-15分钟，直到产生深红色。

测定吸光度：用比色计测定混合物的吸光度，记录下吸光度值。

计算蛋白质浓度：用标准曲线推算样品中蛋白质的浓度。

取植物根茎制作石蜡切片

取石蜡切片做柠檬酸钛的浓度变化

利用浓度变化计算根系泌氧变化