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蛋白芯片技术
蛋白芯片技术,也称蛋白质微阵列(protein microarray),是一种高通量的蛋白分析技术,不仅可以在蛋白质水平上检测基因的表达,用于蛋白质表达谱研究;还可以大规模研究抗原-抗体及其他各种蛋白质-蛋白质的相互作用,以及DNA-蛋白质、RNA-蛋白质的相互作用。目前,用于蛋白芯片技术的方法主要有1种:主要包括芯片制作、样品准备、生物化学反应、检测分析的步骤。
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Th细胞表位的鉴定
Th 细胞表位的鉴定方法主要包括两种,一种是先从患病机体(如肿瘤、病毒感染等)或抗原免疫后机体获得肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)淋巴结细胞或 PBMC。体外用抗原刺激后,进行有限稀释,或分离出 CD4+T 细胞,进行有限稀释。然后再用 γ 射线照射后或丝裂霉素 C 处理后的与相应抗原或其片段孵育过的 PBMC、EB 病毒(EBV)转化后 B 细胞、DC 等作为 APC,用于刺激细胞,获得 CD4T 细
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组织和细胞内miRNA丰度的检测实验
miRNA是长度为20-23个核苷酸的单链小分子RNA,在真核生物由RNA聚合酶II催化、以基因组DNA为模板转录产生,但不翻译为蛋白质。miRNA在进化上保守,并广泛存在于动物、植物、真菌及病毒基因组中。目前,用于组织和细胞内miRNA丰度的检测实验的方法主要有5种:Northern印迹测定组织和细胞内miRNA丰度、实时定量PCR测定组织和细胞内miRNA丰度、微阵列芯片测定组织和细胞内miR
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T淋巴细胞亚群染色技术
T 淋巴细胞亚群染色技术是指利用荧光素标记的抗体作为荧光染料,对细胞膜表面分子或固定破膜后对胞内细胞因子进行标记,然后利用流式细胞仪进行定性定量分析,并可进一步对细胞的种类及功能进行分析研究。
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激素生物测定法检定药品生物制品成品实验
激素生物测定法检定药品生物制品成品实验是使用不同的激素供试品处理实验动物,后续用以观察动物在不同种类药物供试品处理后的生命状态,并与注射激素标准品的动物进行比对。目前用于激素生物测定法检定药品生物制品成品实验主要有 7 种:绒促性毒生物检定法、生长激素生物测定法(大鼠体重法)、升压素生物测定法、升压物质检查法、缩宫素生物测定法、精蛋白锌胰岛素注射液延缓作用检查法和卵泡刺激素生物检定法。
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长链非编码RNA的研究策略及技术
长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是指长度大于200个核苷酸但不编码蛋白质的RNA转录本。lncRNA种类众多,研究表明,小鼠的转录组中共包含大约18万种转录本,其中具有蛋白编码能力的转录本仅有2万余种,而在剩下的16万种中,除了少部分是小RNA之外,绝大多数都是lncRNA。长链非编码RNA可通过多种机制发挥广泛而重要的生物学功能,比如影响基因转录、引起染色
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CFSE检测人外周血T细胞体外扩增
CFSE 检测人外周血 T 细胞体外扩增的是指利用 CFSE 对活细胞进行荧光标记,从而用于检测细胞增殖,细胞周期的估算及细胞分裂等方面,这里仅介绍 CFSE 检测人外周血 CD4+ T,CD8+ T 和 γδ+ T 细胞体外扩增技术。
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其它药物检查法检定药品生物制品成品实验
其它药物检查法检定药品生物制品成品实验是使用不同的药物供试品处理实验动物,后续用以观察动物在不同种类药物供试品处理后的生命状态,并与注射药物标准品的动物进行比对。目前用于其它药物检查法检定药品生物制品成品实验主要有 2 种:葡萄糖酸锑钠毒力检查法和洋地黄生物检定法。
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疫苗效价测定法检定药品生物制品成品实验
疫苗效价测定法检定药品生物制品成品实验是使用不同的疫苗处理实验动物,后续用以观察动物在不同种类疫苗处理后的生命状态,并与未注射疫苗的动物进行比对。目前用于疫苗效价测定法检定药品生物制品成品实验主要有 3 种:吸附破伤风疫苗效价测定法、吸附自喉疫苗效价测定法、人用狂犬病疫苗效价测定法 (NIH 法)。
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Graves 病动物模型
Graves 病动物模型,是针对 Graves 病构建的动物模型。Craves (Graves disease, GD) 是一种以甲状腺功能亢进为主要特征的器官特异性自身免疫性疾病, 在环境与遗传因素的相互作用下,机体免疫系统产生了针对促甲状腺激素受体 (thyrotropin receptor, THSH) 的抗体 (TRAb)。,刺激性抗体 (TSAb) 可模拟 TSH 功能,导致甲状腺激素过
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细胞膜表面分子免疫标记
细胞膜表面分子免疫标记方法,是利用荧光素标记的抗体作为荧光染料,对细胞膜表面分子进行标记,然后利用流式细胞仪进行定性定量分析,并可进一步对细胞的种类及功能进行分析研究。目前,用于细胞膜表面分子免疫标记的方法主要有 5 种:直接免疫荧光染色法、间接免疫荧光染色法、直接荧光标记与间接荧光标记混合染色法、全血免疫荧光染色法和流式细胞多标记分析的荧光补偿。
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自身免疫性甲状腺炎动物模型
自身免疫性甲状腺炎动物模型,是针对自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis, AT) 构建的动物疾病模型。自身免疫性甲状腺炎,是一种器官特异性自身免疫性疾病。由于 AT 患者机体对甲状腺组织自身抗原产生抗体而发生细胞免疫和体液免疫反应,目前 AT 的病因和发病机制尚未完全阐明,应用实验动物进行 AT 的研究建立了实验性 AT 动物模型,以便更好地认识 AT 的发病机制,探寻
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抗毒素效价测定法检定药品生物制品成品实验
抗毒素效价测定法检定药品生物制品成品实验是使用不同的抗毒素处理实验动物,后续用以观察动物在不同种类不同剂量抗毒素处理后的生命状态。目前用于抗毒素效价测定法检定药品生物制品成品实验主要有 4 种:肉毒抗毒素效价测定法(小鼠试验法)、白喉抗毒素效价测定法(家兔皮肤试验法)、破伤风抗毒素效价测定法(小鼠试验法)和气性坏疽抗毒素效价测定法(小鼠试验法)。
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甲状腺肿动物模型
甲状腺肿动物模型,是用豚鼠、小白鼠等作为实验动物,建立的低碘甲状腺肿动物模型和高碘甲状腺肿动物模型。目前,用于构建甲状腺肿动物模型的方法主要有 2 种:低碘性甲状腺肿动物模型和高碘性甲状腺肿动物模型。
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药品生物制品成品检定常用动物实验
药品生物制品成品检定动物实验所依据的标准是现行版《中国药典》,根据不同的分类方法,可将《中国药典》中的药品成品检定动物实验分成多种类别。按照检定药品的种类,可将动物实验分为中药动物实验、化药动物实验、生物制品动物实验。目前,用于药品生物制品成品出厂检定动物实验主要有 3 种:热原试验(体内法即家兔检测法)、乳鼠试验和异常毒性试验。
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甲状腺功能减退动物模型
甲状腺功能减退动物模型,是选用大鼠作为实验动物用抗甲状腺药物诱导构建的疾病模型。目前,用于甲状腺功能减退动物模型的方法主要有 3 种:抗甲状腺药物诱导甲减模型、先天性甲减模型、甲状腺切除甲减模型。
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蛋白质糖基化分析
蛋白质的糖基化 (glycosylation) 是目前已知最为复杂的蛋白质翻译后修饰,由 8 种单糖参与构成的各种复杂寡糖链与蛋白质连接形成。蛋白质糖基化分析包括:蛋白质是否发生了糖基化及糖基连接形式 、糖基化位点分析和糖链结构分析。蛋白质糖基化分析的方法主要有两种:内切糖苷酶分析 N- 连接寡糖和糖基化抑制剂用千鉴定糖蛋白。
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再生障碍性贫血动物模型
再生障碍性贫血动物模型,是使用化学或物理的方法构建模型用于研究再生障碍性贫血。再生障碍性贫血(aplastic anemia),简称再障,系多种病因引起的造血系统退行性病变,红骨髓总容量不断减少,黄骨髓不断增加,造血衰竭,以全血细胞减少为主要表现的一组综合征。再障的发病机制尚未完全阐明,目前存在 4 种假说:①「种子」学说,再障与患者造血干细胞存在某种内在缺陷有关。②「土壤」学说,再障与患者的造血
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血栓性疾病动物模型
血栓性疾病动物模型,是根据血栓发生方式建立的疾病动物模型。血栓性疾病是一类常见的严重疾病。由血栓形成和血栓栓塞两种病理过程所引起的疾病称之为血栓性疾病。按血栓的组成成分可分为白色血栓、红色血栓、混合血栓和透明血栓,按其形成的部位分为动脉血栓 静脉血栓、心房宅血栓和微血管血栓。目前,用于血栓性疾病动物模型的方法主要有 5 种:动-静脉旁路血栓形成动物模型、电刺激血栓形成动物模型、急性肺血栓栓塞症动物
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特发性血小板减少性紫瘢动物模型
特发性血小板减少性紫瘢动物模型,是用动物构建的特发性血小板减少性紫瘢(ITP)模型。特发性血小板减少性紫瘢(ITP)是一种自身免疫出血性性疾病,以广泛皮肤黏膜、内脏出血、血小板减少,骨髓巨核细胞计数正常或增加伴成熟障碍,缺乏任何原因包括外源性或继发性因素为特征,故称之为自身免疫性血小板减少性紫癜。目前,构建特发性血小板减少性紫瘢动物模型的方法主要有 2 种:特发性血小板减少性紫瘢兔模型、特发性血小
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