小鼠解剖取材

小鼠胚胎泌尿系统体外培养实验的基本过程可分为如下几步：A 按标准操作取 E11.5～E15.5 小鼠胚胎。B 以下操作均在超净台中进行。C 将胚胎置于有 PBS 缓冲液的 10 cm 细胞培养皿中。D 去除胚胎的头部，必要时留下卵黄膜或尾巴做基因型鉴定E 转移剩余部分到 10 cm 细胞培养皿盖中，按照标准操作取出泌尿系统。F 对于 E11.5 胚胎，泌尿系仅发育到输尿管芽阶段，此时取出输尿管芽以

诱导性多潜能干细胞（iPS 细胞）是具有形成人和动物个体所有类型细胞的多向分化潜能并自我更新的一类细胞。iPS 细胞不仅可以表现为类 ES 细胞的特性，还避免了 ES 细胞的伦理道德问题，解决了多潜能性细胞的来源问题；避免了免疫排斥，为发育生物学以及组织器官构建的研究工作提供了模型；为研究特异性疾病的药物治疗提供了检测数据，对提高药物的效价、降低药物对机体的毒性等方面具有深远意义。

对胰岛功能不仅可以体内评估，也可以将胰岛分离出来在培养条件下检测其胰岛素分泌功能，以排除其他组织对整体分析结果的影响，因此分离胰岛作为对胰岛功能独立检测及提取蛋白质或 RNA 用于分子研究都是极为有用的基本操作。

流式细胞术应用广泛，是免疫表型及功能分析的常见实验方法。而获得高质量的单细胞悬液是流式实验成功的关键因素。本为以小鼠结肠固有层免疫细胞分离为例，对单细胞悬液的获取方法进行简述。

基本方案 12.为 检 验 细 胞 纯 度 ，可 加 入 终 浓 度 为 lOug/ml 的 抗 C D 3- F I T C 和 P K 136-PE (抗N K 1. 1 ) 抗体，进 行 流 式 分 析（第四章）。 ​

哺乳动物的卵子发生在卵巢的卵泡内进行。在卵母细胞成熟发育阶段，初级卵母细胞发生生发泡破裂(germinalvesicle breakdown,GVBD)现象，并完成第一次成熟分裂(减数分裂，以同源染色体分离为特征)，并排出第一极体。一般认为，GVBD的发生和第一极体的排出是卵母细胞核成熟的标志。之后，次级卵母细胞进行第二次成熟分裂(一般为有丝分裂,以染色单体分离为特征)，并停滞在第二次成熟分裂中期

一、间脑 （一）间脑的外形 取脑干、脑正中矢状切及大脑水平断面染色标本，并结合脑的模型观察间脑各部结构。 间脑位于中脑和大脑半球之间，被两侧大脑半球覆盖，间脑分为背侧丘脑、上丘脑、后丘脑、下丘脑和底丘脑。 1．背侧丘脑 为两个卵圆形的灰质团块。前端凸隆称丘脑前结节，后端膨大称丘脑枕。背侧丘脑的背面为侧脑室的底。在脑正中矢状切标本上，可见背侧丘脑内侧面构成第三脑室外侧壁的一部分、内侧面中央有

人和小鼠的脂肪组织均可用于分离ASC，可以获得相当数目的ASCs。人脂肪组织通常来源于抽脂。小鼠脂肪组织则取自腹股沟处脂肪垫。

小鼠胚胎泌尿系统获取实验的基本过程可分为如下几步：A 按标准操作进行配鼠，检栓。B 取怀孕所需特定天数雌鼠，断颈处死，取得胚胎放入 PBS 缓冲液中。C 小鼠胚胎的泌尿系统从胚胎期 12.5 天（E12.5）开始可以从体内完整分离出来，在 E12.0 前一般选择在体外观察和实验。E17.5 以后的胚胎由于体积较大，取泌尿系统之前最好把胚胎固定。D 去掉胚胎头部，打开胚胎的胸腔和腹腔。E 泌尿系统处

小鼠的发育起始于受精卵的形成，其胚胎发生的早期发育与比其他模式生物慢很多。小鼠胚胎处于2-细胞期在没有明显体积增大的情况下缓慢卵裂，并沿输卵管向子宫移动，直至受精4.5天后植入子宫。在此过程中，受精卵经桑椹形成（compartion）成为一个实心的细胞球-桑椹胚（morula）。桑椹胚外部形成滋养外胚层（tmphectoderm），未来将分化为胚胎的附属结构如胎盘；内部则形成内部细胞团（inner

胚胎是怀孕最初两个月内的幼体。囊胚、胚的早期发育和胚胎发育是一个连续过程。在体节时期，三个胚层都发生了变化。外胚层在背部中线凹陷成沟，称神经沟，沟的两岸称神经脊。神经脊逐渐接近、愈合，致使神经演变为纵贯胚体的神经管。神经管和神经脊将来演化为神经系统。内胚层随着胚体卷曲成管状，称原肠，原肠依部位又分为前肠、中肠和后肠。

巨噬细胞（macrophages，MΦ）是由血液中单核细胞迁入组织后分化形成的成熟类细胞，广泛分布于脾脏、肝脏、腹腔、骨髓、神经系统以及结缔组织等，具有吞噬杀伤、抗原提呈及免疫调节作用。根据不同的表型和功能特点通常将其分为两种类型：经典活化的巨噬细胞（classically activated macrophage，CAM），又称 M1 型巨噬细胞；替代性活化的巨噬细胞（alternatively

一、口腔 用头部正中矢状断面标本，也可用镜子对照自己的口腔观察和辨认以下结构：口腔前界为上下口唇，后界与咽相通；两侧壁为颊；上壁为腭，腭分前部的硬腭和后部的软腭；下壁为口腔底，被舌所占据。口腔内面覆以粘膜。口腔又可分为口腔前庭和固有口腔两部分，它们以何为界？ 1．牙 分辨切牙、尖牙、前磨牙和磨牙，并计算各种牙的数目并写出牙式。每个牙都可分为牙冠、牙颈和牙根三部分。 2．舌位 位于口腔底。在舌

1）将小鼠放在操作台或饲养盒盖上。2）操作人员一只手抓住鼠尾根部，另一只手的拇指和食指迅速用力往下按住其头部。3）两手同时用力使之颈椎脱臼，造成脊髓与延髓断离，小鼠立即死亡。4）检査小鼠呼吸、心跳是否停止，确认动物死亡。

1）往小鼠腹腔或静脉注射适量的全身麻醉药剂（戊巴比妥钠或三漠乙醇）。2）待小鼠进入麻醉状态后，用手术刀或剪刀切断其颈动脉或股动脉。3）检査呼吸、心跳是否停止,确认动物死亡。

1） 将动物放入动物 CO₂ 多功能麻醉机内。2） 选择“小白鼠安乐死程序”“大白鼠安乐死程序”或“用户自定义程序”，打开 CO₂ 钢瓶阀门。3）待机器停止后，关闭 CO₂ 钢瓶阀门。4）检查动物呼吸、心跳是否停止，确认动物死亡。

1）使用小鼠吸入麻醉机，使动物吸入过量麻醉剂，一般选择异氟烷。2）检查小鼠呼吸、心跳是否停止，确认死亡。

1、小鼠麻醉后，待其身体变软，仰面固定于手术台上，75% 酒精消毒表面皮肤。2、沿正中线剪开皮肤，露出腹膜。如果解剖的前一步为腹主动脉采血，则从剑突位置剪至下颌，然后向左右两侧剥离皮肤。3、观察有无水肿、出血等。4、观察皮下有无肿瘤，浅表淋巴结有无肿大。如实验要求对浅表淋巴结进行取材，则将其取下后放入事先标记好的包埋盒内再固定。

1、小鼠麻醉后，待其变软，固定于手术台上，75% 酒精消毒表面皮肤。2、观察腹膜、腹腔内脏器位置、膈肌及有无腹水。3、肝、胆囊观察首先检查肝脏大小、被膜的性状、边缘的厚薄、肝脏硬度和色泽等。然后剪断肝镰状韧带，用镊子小心取出肝，观察各叶横膈及侧面，称重后切开数个切面，观察切面的出血量、色泽、有无脓肿或坏死等变化。同时观察包膜、有无膨隆等。剪开胆囊观察黏膜和胆汁色泽、浑浊程度等。4、脾观察剪开胃、肾

1） 用组织镶提起剑突，沿左右两侧肋软骨结合处向上剪断至胸锁关节，观察胸膜、胸腺、肺及胸水，如有异常内容物要观察量、色等性状。取胸骨横切，观察骨髓颜色并取出。2） 剥离胸腺并取出。3） 观察心包色泽、光滑度及心包积水量、色、性状。4） 在气管分支部位上方切断气管，观察肺门淋巴结。取出胸主动脉、食管、肺及心脏，分别分离胸主动脉和食管。切断心脏顶端动静脉起始部，将心脏和肺分离。5）剪断颈部胸骨舌骨肌及