材料与仪器
器材：
体式解剖镜、眼科剪、眼科镊、显微镊、插入式培养皿（0.4 μm pore size)
试剂：
① 1 x PBS 缓冲液
② DME/F121:1
③ 丙酮酸钠 100 mmol/L
④ penicillin（20 万 U/ml）
⑤ streptomycin（20 万 U/ml）
⑥ FBS
步骤
小鼠胚胎泌尿系统体外培养实验的基本过程可分为如下几步：
A 按标准操作取 E11.5～E15.5 小鼠胚胎。
B 以下操作均在超净台中进行。
C 将胚胎置于有 PBS 缓冲液的 10 cm 细胞培养皿中。
D 去除胚胎的头部，必要时留下卵黄膜或尾巴做基因型鉴定
E 转移剩余部分到 10 cm 细胞培养皿盖中，按照标准操作取出泌尿系统。
F 对于 E11.5 胚胎，泌尿系仅发育到输尿管芽阶段，此时取出输尿管芽以及终肾间充质所在部分，大概位于胚胎后肢位置，背部侧面。
G 将插入式培养皿放入 24 孔板的孔内，每个孔分别在小室内外加入 50 μl 和 300 μl 含有 10% FBS 的 DME/F121:1 培养基（丙酮酸钠 1 mmol/L，双抗），37 ℃ 预热。
H 将取出的泌尿系统小心放在小室的膜上。
I 37 ℃ 培养。
J 每天换液，在显微镜下观察肾脏和输尿管的生长情况。
K 培养后的胚胎泌尿系统可以进一步进行组织学检测或分子水平的检测。结果示例如图 8-6-2 所示。
注意事项
1．无菌操作。
2．胚胎的大小按照实验需要。胚胎早期（E11.5～E12.5）的肾原基培养可用于检测输尿管芽在特定条件下的分叉以及上皮与间充质细胞的相互作用。晚期泌尿系统的培养，可以用于观察特定条件下肾单位的成熟以及输尿管旁各细胞层的发育和分化。
3．培养时间可从数小时到 1 周。目前曾有 2 周培养泌尿系统的报道。
来源：丁香实验
