小鼠胚胎泌尿系统获取实验

器材：

体式解剖镜、眼科剪、眼科镊、显微镊。

试剂：

① 1 x PBS 缓冲液

小鼠胚胎泌尿系统获取实验的基本过程可分为如下几步：

A 按标准操作进行配鼠，检栓。

B 取怀孕所需特定天数雌鼠，断颈处死，取得胚胎放入 PBS 缓冲液中。

C 小鼠胚胎的泌尿系统从胚胎期 12.5 天（E12.5）开始可以从体内完整分离出来，在 E12.0 前一般选择在体外观察和实验。E17.5 以后的胚胎由于体积较大，取泌尿系统之前最好把胚胎固定。

D 去掉胚胎头部，打开胚胎的胸腔和腹腔。

E 泌尿系统处于腹腔背部紧贴小鼠的体腔壁。把靠腹腔腹部的组织器官如消化道、肝脏、脾脏等移除。这时可以看到两个椭圆形豆状的器官，就是肾脏。肾脏通过输尿管连接到胚胎腹腔下部的膀胱。小心地用显微镊把泌尿系统由膀胱开始从体腔壁上分离下来，可以带一些其他的组织，下一步再仔细分离。

F E13.5 之前，由于泌尿系统较小，这一步可在显微镜下进行操作。

G 将取得的泌尿系统放入 PBS 缓冲液中，借助体式解剖镜观察。仔细分离掉除泌尿系统以外的其他器官组织，如膀胱输尿管连接处一般会连有直肠，输尿管一般与一些血管并行，肾脏可能会连有肝脏或膈膜的一部分。每个肾脏上靠头部的位置都有一个颜色偏红的小点，是肾上腺。

H 如果需要对泌尿系统进一步分离，可在体式解剖镜下取得肾脏，输尿管和膀胱。这一步通常针对 E13.5 以后的胚胎。

I 必要时用胚胎的尾巴或卵黄膜提取 DNA，进行基因鉴定。结果示例如图 8-6-1 所示。