PCR 是分子生物学科研人员必做的实验,为了扩增目的基因,经常要对 PCR 的体系进行“摸条件”,特别是一些 GC 含量高的目的基因或者 DNA 纯度不高的样本! “摸条件”成为 PCR 实验最费时费力的工作! 虽然市场上有很多 PCR 的 MasterMix 试剂,将酶、dNTP、反应缓冲液混合在一起,很方便客户的使用,但仅仅是简单的混合,极少公司对MIX的应用范围进行广泛的实验和优化,只能做一些不复杂的 PCR。 百泰克通过长时间、无数次的实验优化,终于推出了适用范围广、稳定性良好
那么如何通过改变抗体稀释液的配方,寻求抗体孵育的最佳条件呢?首先要认清,抗体稀释液没有一个绝对通用的配方;一种抗体一个脾气。其次,抗体稀释液的配方要兼顾与特异性抗体竞争抗原的强度,以及对其他区域的封闭强度两方面的平衡。目前,抗体稀释液中可以充当封闭蛋白的主要有milk,BSA和gelatin,似乎很少的样子 。。。可是,你有没有考虑过“复方”?--这下配方无限多了吧。1. 采用milk,BSA和gelatin的单方。3% milk,5% BSA,2.很多情况下单方的浓度很高了,背景问题仍不能
染色质免疫沉淀(Chromatin Immunoprecipitation, ChIP)是研究体内(划重点鸭,体内)蛋白质与DNA相互作用的一种技术。它利用抗原抗体反应的特异性,可以真实地反映体内蛋白因子与基因组DNA结合的状况。可应用于组蛋白修饰、DNA复制与损伤相关因子结合分析、干细胞调控转录因子及辅因子等基因表达机制的广泛研究。 最近有做chIP的朋友来找我们咨询: 为什么我的ChIP实验做出来, 结果就是不理想呢? 为得到理想的ChIP结果,可以做以下实验条件优化: 1、 染色
蛋白来源:肿瘤手术标本 蛋白名称(可保密):转录因子 蛋白分子量:33 KDa WB用膜类型、孔径:PVDF膜 转膜方式(恒压、恒流):350 mA 恒流 转膜时间:150 min 转膜设备:湿转 Bio-Rad 说明:相同条件曾用于数个30-70 KDa的蛋白,都能成功转上,不过没有试缩短时间效果