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简介
来源:丁香实验
操作方法
在复合培养基如YPAD中,当接种足量的细胞并于30℃培养过夜(16小时),使其分裂10代,大多数酵母菌株滴度可达2 x 108到3 x 108个细胞/ml; 而在合成培养基如SC减样选择培养基中,细胞滴度为1 x 107到2 x 107个细胞/ml。可以用几种方法来检测培养物的滴度,如测定600nm处的光密度(OD600),或用血细胞计数器和显微镜进行细胞计数。对大多数菌株来说, OD600为0.
菌落的影印培养1. 将一块灭菌的方天鹅绒绒面向上展平在复制柱上,并用金属环固定,注意不要接触天鹅绒表面。 2. 把有酵母集落的平板翻过来,小心放在天鹅绒表面上,轻轻地用力以保证所有的集落压印在绒面上。 3. 慢慢将平板移开,使尽量多的接种物黏在天鹅绒上。 4. 将一个新平板翻转放在天鹅绒上,轻柔压下使绒面与琼脂表面完全接触。 5. 慢慢将平板移开可以转移大部分接种物,如需要较少接种物可以快速移开平板。通
酵母培养物的储存一、短期保存 酵母菌株可以用 YPAD 或 SC 减样选择培养基平板于冰箱或冷室中常规保存,当实验需要时应用一个新平板进行划线培养以获得单菌落。 二、长期保存 1. 用 YPAD 或 SC 减样选择培养基平板培养菌株。 2. 用接种环或牙签刮几次细胞,重悬于 20% 的灭菌甘油中,置于微量离心管或冻存管中。 3. 放入 -70℃ 的储存盒中。 4. 从冻存的悬液顶部刮少量样品在 YPA
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