不同条件pcr，条带相同

基因扩增大小小于期望大小的原因可能有很多种，包括引物设计问题、扩增条件不恰当、DNA模板质量问题等。针对你提供的PCR条件，建议尝试以下优化：尝试增加退火温度，比如从45℃调整到50℃或更高的温度，看看是否能够增加扩增产物大小。
延长延伸时间，比如从1分钟延长到2分钟。确保使用高质量的DNA模板，并检查模板DNA的浓度是否适当。如果以上优化步骤无法解决问题，建议尝试更换引物，并重新进行优化。

可能要考虑以下这几种情况：

1、低质量的cDNA：cDNA合成过程中可能存在RNA降解、反转录不完全或反转录过程中引入的污染物等问题，导致cDNA质量不佳，从而影响PCR扩增效果。

2、PCR反应条件不当：PCR反应条件包括温度、反应时间、引物浓度、酶浓度、缓冲液等，如果这些条件设置不当，可能会影响PCR扩增效果。

3、引物设计问题：引物的设计可能存在问题，比如引物长度不合适、引物序列中存在不稳定结构、引物与模板匹配度不佳等，都可能导致PCR扩增失败。