Borrowed from David Bowtell (bowtell@ariel.ucs.unimelb.edu.au) Transfer the srongest positive clones to a 24 well plate by scraping the adhering cells with a truncated yellow tip. Bring the volume to 1 ml using
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(一)保存 当获得产生所需的单克隆 抗体的杂交瘤细胞 后,必须将一部分杂交瘤细胞 保存,否则在连续传代的过程中,可能产生突变或染色体的漂移以至丧失固有特性或丢失产生抗体的特性。另外在长期的培养过程中,难免不发生污染以至于毁灭。所以必须冷藏保存一部分。保存方法如下: 1.材料 (1) 细胞 :取对数生长期的细胞 。 (2) 10%二甲基亚砜保护液(二甲基亚砜能损坏滤器,而又被高压所破坏
相关专题 1) 瘤细胞培养 (无特殊要求) 骨髓瘤细胞呈悬浮或轻微附着形式生长,如附着性生长的细胞多时,用吸管轻轻吹打或轻轻叩击培养容器即可分离下来。通常要维持细胞于指数生长期(细胞培养时间为15~20小时),每3~5天取细胞0.2~1ml移入到10ml新培养液中,其最大细胞密度不能超过5×105~106/ml。一般使用含有高糖的DMEM 培养液,并补加有pH的稳定剂HEPES。 2)免疫 小鼠和脾细胞